ВЛИЯНИЕ СПОСОБА СТЕРИЛИЗАЦИИ НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ИНКАПСУЛИРОВАННЫХ В АЛЬГИНАТНЫЙ ГЕЛЬ КЛЕТОК КУЛЬТУРЫ MOLT-4
https://doi.org/10.17650/1726-9784-2020-19-3-46-51
Аннотация
Введение. Инкапсуляция в альгинатный гель широко применяется в биомедицинских исследованиях для защиты клеток от механического воздействия и контакта с иммунной системой реципиента. Применение альгината для пересадки биомедицинских клеточных продуктов человеку налагает высокие требования к стерильности конечного продукта. С целью подбора оптимального протокола инкапсуляции клеток для дальнейшего применения in vitro или трансплантации заключенных в альгинатный гель клеток необходимо изучить, как процессы стерилизации влияют на такие характеристики получаемого геля, как способность к поддержанию жизнеспособности и клеточной пролиферации.
Цель исследования – сравнительное изучение влияния ультрафиолетового излучения и автоклавирования на биологические свойства альгинатного геля.
Материалы и методы. Клетки культуры MOLT-4 были заключены в бусины из 1, 2 и 4 % альгината в концентрации 0,75 × 106 кл/мл. На 8-е сутки культивирования проводилось измерение размера колоний и определение жизнеспособности клеток в автоматическом клеточном счетчике.
Результаты. Площадь колоний для всех вариантов концентрации альгинатного геля оказалась достоверно выше для геля, стерилизованного обработкой ультрафиолетовыми лучами, по сравнению с автоклавированием. Разница в размерах колоний для 2 способов стерилизации альгината оказалась достоверной при принятом уровне значимости для всех вариантов концентраций геля (α = 0,05, df = 198, t = 1,972). При этом в вариантах опыта существенных отличий в количестве жизнеспособных клеток после растворения альгината не отмечено.
Заключение. Cтерилизация автоклавированием приводит к подавлению пролиферации заключенных в него клеток и не может быть рекомендована для применения в протоколах подготовки альгинатных капсул с заключенными в них клетками для культивирования in vitro и in vivo.
Об авторах
О. И. Кит
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России
Россия
Россия
С. Ю. Филиппова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России
Россия
Светлана Юрьевна Филиппова
Россия
Светлана Юрьевна Филиппова
А. О. Ситковская
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России
Россия
Россия
В. В. Позднякова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России
Россия
Россия
О. В. Хохлова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России
Россия
Россия
Список литературы
1. Omami M., McGarrigle J.J., Reedy M. et al. Islet microencapsulation: strategies and clinical status in diabetes. Curr Diab Rep 2017;17(7):47. DOI: 10.1007/s11892-017-0877-0.
2. Espona-Noguera A., Ciriza J., CañibanoHernández A. et al. Review of advanced hydrogel-based cell encapsulation systems for insulin delivery in type 1 diabetes mellitus. Pharmaceutics 2019;11(11):597. DOI: 10.3390/pharmaceutics11110597.
3. Cernigliaro V., Peluso R., Zedda B. et al. Evolving cell-based and cell-free clinical strategies for treating severe human liver diseases. Cells 2020;9(2):386. DOI: 10.3390/cells9020386.
4. Bhere D., Shah K. Stem Cell-Based Therapies for Cancer. Adv Cancer Res 2015;127:159–89. DOI: 10.1016/bs.acr.2015.04.012.
5. Mohr A., Zwacka R. The future of mesenchymal stem cell-based therapeutic approaches for cancer – from cells to ghosts. Cancer Lett 2018;414:239–49. DOI: 10.1016/j.canlet.2017.11.025.
6. Andersen T., Auk-Emblem P., Dornish M. 3D Cell Culture in Alginate Hydrogels. Microarrays (Basel) 2015;4(2):133–61. DOI: 10.3390/microarrays4020133.
7. Read T., Sorensen D.R., Mahesparan R. et al. Local endostatin treatment of gliomas administered by microencapsulated producer cells. Nat Biotechnol 2001;19(1):29–34. DOI: 10.1038/83471.
8. Teng H., Zhang Y., Wang W. et al. Inhibition of tumor growth in mice by endostatin derived from abdominal transplanted encapsulated cells. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai) 2007;39(4):278–84. DOI: 10.1111/j.1745-7270.2007.00273.x.
9. Zhang Y., Wang W., Xie Y. et al. In vivo culture of encapsulated endostatinsecreting Chinese hamster ovary cells for systemic tumor inhibition. Hum Gene Ther 2007;18(5):474–81. DOI: 10.1089/hum.2006.166.
10. Hodder E., Duin S., Kilian D. et al. Investigating the effect of sterilisation methods on the physical properties and cytocompatibility of methyl cellulose used in combination with alginate for 3D-bioplotting of chondrocytes. J Mater Sci Mater Med 2019;30(1):10. DOI: 10.1007/s10856-018-6211-9.
Рецензия
Для цитирования:
Кит О.И., Филиппова С.Ю., Ситковская А.О., Позднякова В.В., Хохлова О.В. ВЛИЯНИЕ СПОСОБА СТЕРИЛИЗАЦИИ НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ИНКАПСУЛИРОВАННЫХ В АЛЬГИНАТНЫЙ ГЕЛЬ КЛЕТОК КУЛЬТУРЫ MOLT-4. Российский биотерапевтический журнал. 2020;19(3):46-51. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2020-19-3-46-51
For citation:
Kit O.I., Filippova S.Yu., Sitkovskaya A.O., Pozdnyakova V.V., Khokhlova O.V. INFLUENCE OF THE STERILIZATION METHOD ON THE PROLIFERATION AND VIABILITY OF MOLT-4 CELLS ENCAPSULATED IN ALGINATE GEL. Russian Journal of Biotherapy. 2020;19(3):46-51. (In Russ.) https://doi.org/10.17650/1726-9784-2020-19-3-46-51
Просмотров:
338
Послать статью по эл. почте 
