Взаимосвязь лимфоидных популяций (инфильтрации) первичной опухоли с иммунными реакциями в костном мозге у больных раком молочной железы

Введение. На сегодняшний день иммунотерапия прочно входит в стандарты лечения рака. Базисом для назначения иммунотерапии являются иммунологические маркеры опухоли, в том числе лимфоидная инфильтрация, изучению которой в последнее десятилетие уделяется все большее внимание. Несомненный интерес представляет исследование лимфоидной инфильтрации не только в зависимости от морфо-клинических показателей рака молочной железы (РМЖ), но и иммунной системы костного мозга.
Цель исследования – оценить инфильтрацию первичной опухоли лимфоцитами в зависимости от морфо-клинических характеристик РМЖ и иммунных реакций в костном мозге.
Материалы и методы. В исследование включены 125 больных РМЖ, которые получали лечение в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Преобладали больные с РМЖ II стадии, умеренной дифференцировки (G2). Люминальный подтип РМЖ составил 67 %, нелюминальный – 33 %. Выполнено иммунофенотипирование первичной опухоли (криостатные срезы). Использовали люминесцентный микроскоп ZEISS Axioscope (Zeiss AG, Германия). Оценены CD45+-, CD38+-, Т- и В-клеточная инфильтрация. Костный мозг: изучены CD3+-, CD4+-, CD8+-, CD19+-, CD16+-, CD56+-популяции. В работе использовали проточный цитометр FACSCanto II (США), программу Kaluza Analysis v2.1 (Beckman Coulter, США).
Результаты. СD45+-инфильтрация отмечена в 50,5 % случаев (30 % – выраженная, 26,4 % – умеренная). CD8+- клетки в 21,4 % случаев выраженно инфильтрировали опухоль. В 40 % случаев установлена CD38+-инфильтрация. При нелюминальном РМЖ выраженная CD45-инфильтрация отмечалась чаще, чем при люминальном (33 и 26 % соответственно). CD38+-инфильтрация выражена при нелюминальном РМЖ (p = 0,016). Инфильтрация СD45+ положительно коррелировала с ранними стадиями заболевания (р = 0,071) и была более выражена при инфильтративно-протоковом, чем при дольковом РМЖ: 59,2 и 20 % соответственно (р = 0,05). В костном мозге доля CD45RO+-клеток при люминальном РМЖ была больше, чем при нелюминальном: 37,3 ± 2,3 и 28 ± 2,8 % соответственно, р = 0,04. Напротив, доля CD19+CD38+-клеток была меньше: 24,2 ± 2 и 34,8 ± 6 %, р = 0,041. Интратуморальные лимфоциты достоверно отрицательно коррелировали с костномозговыми лимфоидными популяциями: CD38+-клетки – с NK-клетками; СD4+-клетки – с В-предшественниками; CD8+-клетки – c В1-лимфоцитами.
Заключение. Лимфоидная инфильтрация РМЖ имеет связь со стадией, размером опухоли, гистологическим видом, биологическим подтипом. Интратуморальные популяции СD38+-, СD4+-, CD3+-, CD8+-клеток находятся в отрицательной корреляционной связи с лимфоидными популяциями костного мозга.

1. Global Cancer Statistics 2020. IARC. Available at: https://gco.iarc.fr/today/data/factsheets/cancers/20-Breast-fact-sheet.pdf.

2. Ferlay J., Colombet M., Soerjomataram I. et al. Cancer statistics for the year 2020: an overview. Int J Cancer 2021;149:778–89. DOI: 10.1002/ijc.33588

3. De Sousa V.M.L., Carvalho L. Heterogeneity in lung cancer. Pathobiology 2018;85(1–2):96–107. DOI: 10.1159/000487440

4. Чулкова С.В., Маркина И.Г., Антипова А.С. и др. Роль стволовых опухолевых клеток в канцерогенезе и прогнозе меланомы. Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии 2018;18(4):100–16.

5. Chernysheva O., Markina I., Demidov L. et al. Bone marrow involvement in melanoma. Potentials for detection of disseminated tumor cells and characterization of their subsets by flow cytometry. Cells 2019;8(6):627. DOI: 10.3390/cells8060627

6. Schüler-Toprak S., Weber F., Skrzypczak M. et al. Expression of estrogen-related receptors in ovarian cancer and impact on survival. Cancer Res Clin Oncol 2021;147(9):2555–67. DOI: 10.1007/s00432-021-03673-9

7. Чулкова С.В. Биомаркеры стволовых клеток желудка. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии 2018;21(10):11–7. DOI: 10.29296/25877313-2018-10-02

8. Chang R.B., Beatty G.L. The interplay between innate and adaptive immunity in cancer shapes the productivity of cancer immunosurveillance. J Leukoc Biol 2020;108(1):363–76. DOI: 10.1002/ JLB.3MIR0320-475R

9. Чулкова С.В., Стилиди И.С., Глухов Е.В. и др. Селезенка – периферический орган иммунной системы. Влияние спленэктомии на иммунный статус. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН 2014;25(1–2(94)):21–5.

10. Gerada Ch., Ryan K.M. Autophagy, the innate immune response and cancer. Mol Oncol 2020;14(9):1913–29. DOI: 10.1002/1878-0261.12774

11. Чулкова С.В., Шолохова Е.Н., Грищенко Н.В. и др. Ключевая роль популяций В1-лимфоцитов в иммунном ответе у больных раком желудка. Российский биотерапевтический журнал 2018;17(4):64–70. DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-4-64-70

12. Huszno J., Nożyńska E.Z., Lange D. et al. The association of tumor lymphocyte infiltration with clinicopathological factors and survival in breast cancer. Pol J Pathol 2017;68(1):26–32. DOI: 10.5114/pjp.2017.67612

13. Li J., Byrne K.T., Yan F. et al. Tumor cell-intrinsic factors underlie heterogeneity of immune cell infiltration and response to immunotherapy. Immunity 2018;49:178–93.e7. DOI: 10.1016/j.immuni.2018.06.006

14. Gooden M.J.M., De Bock G.H., Leffers N. et al. The prognostic influence of tumour-infiltrating lymphocytes in cancer: a systematic review with meta-analysis. Br J Cancer 2011;105(1):93–103. DOI: 10.1038/bjc.2011.189

15. Артамонова Е.В. Роль иммунофенотипирования в диагностике и прогнозе рака молочной железы. Иммунология гемопоэза 2009;1(9):8–52.

16. De Groot A.F., Blok E.J., Charehbili A. Strong CD8+ lymphocyte infiltration in combination with expression of HLA class I is associated with better tumor control in breast cancer patients treated with neoadjuvant chemotherapy. Breast Cancer Res Treat 2019;175(3):605–15. DOI: 10.1007/s10549-019-05195-y

17. Заботина Т.Н., Черткова А.И., Борунова А.И. и др. Взаимосвязь субпопуляций лимфоцитов больных раком молочной железы с результатами лечения. Российский биотерапевтический журнал 2021;20(3):25–33. DOI: 10.17650/1726-9784-2021-20-3-25-33

18. Субботина А.В., Летягин В.П., Тупицын Н.Н. и др. Роль иммунофенотипирования рака молочной железы в процессе неоадъювантной химиотерапии. Иммунология гемопоэза 2009;1(9):52 –79.

19. Denkert C., Von Minckwitz G., Darb-Esfahani S. et al. Tumourinfiltrating lymphocytes and prognosis in different subtypes of breast cancer: a pooled analysis of 3771 patients treated with neoadjuvant therapy. Lancet Oncol 2018;19(1):40–50. DOI: 10.1016/S1470-2045(17)30904-X

20. Буров Д.А., Безнос О.А., Воротников И.К. и др. Клиническое значение экспрессии молекул гистосовместимости на клетках рака молочной железы. Иммунология гемопоэза 2016;2(14):33–53.

21. Axelrod M.L., Cook R.S., Johnson D.B. et al. Biological consequences of MHC-II expression by tumor cells in cancer. Clin Cancer Res 2019;25:2392–402. DOI: 10.1158/1078- 0432.CCR-18-3200

22. Горбунова Т.В., Поляков В.Г., Серебрякова И.Н. и др. Сравнительный анализ субпопуляционного состава лимфоцитов костного мозга у детей при мелкоклеточных саркомах. Иммунология 2012;33(1):37–44.

23. Feuerer M., Rocha M., Bai L. Enrichment of memory T cells and other profound immunological changes in the bone marrow from untreated breast cancer patients. Int J Cancer 2001;92(1): 96–105.

24. Рябчиков Д.А., Безнос О.А., Дудина И.А. и др. Диссеминированные опухолевые клетки у пациентов с люминальным раком молочной железы. Российский биотерапевтический журнал 2018;17(1):53–7. DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-1-53-57

25. Solomayer E.F., Feuerer M., Bai L. et al. Influence of adjuvant hormone therapy and chemotherapy on the immune system analyzed in the bone marrow of patients with breast cancer. Clin Cancer Res 2003;9(1):174–80.

26. Тупицын Н.Н., Джуманазаров Т.М., Палладина А.Д. и др. Иммунологические показатели костного мозга больных немелкоклеточным раком легкого. Российский биотерапевтический журнал 2020;19(2):47–54. DOI: 10.17650/1726-9784-2020-19-2-47-54

27. Goldberg J., Pastorello R.G., Vallius T. et al. The immunology of hormone receptor positive breast cancer. Front Immunol 2021;12:674192. DOI: 10.3389/fimmu.2021.67419261

28. Thompson E., Taube J.M., Elwood H. et al. The immune microenvironment of breast ductal carcinoma in situ. Mod Pathol 2016;29(3):249–58. DOI: 10.1038/modpathol.2015.158

29. Sobral-Leite M., Van de Vijver K., Michaut M. et al. Assessment of PD-L1 expression across breast cancer molecular subtypes, in relation to mutation rate, BRCA1-like status, tumorinfiltrating immune cells and survival. Oncoimmunology 2018;7(12):e1509820. DOI: 10.1080/2162402X.2018.1509820

30. Retecki K., Seweryn M., Graczyk-Jarzynka A., Bajor M. The immune landscape of breast cancer: strategies for overcoming immunotherapy resistance. Cancers (Basel) 2021;13(23):6012. DOI: 10.3390/cancers13236012

31. Soysal S.D., Tzankov A., Muenst S.E. Role of the tumor microenvironment in breast cancer. Pathobiology 2015;82(3–4): 142–152. DOI: 10.1159/000430499

32. Мкртчян В.А., Воротников И.К., Чернышева О.А. и др. Взаимосвязь между NK-клетками костного мозга больных раком молочной железы и биологическими особенностями опухоли и эритропоэзом. Онкогинекология 2019;(3):4–13.