МОДЕЛИРОВАНИЕ ПОДКОЖНОГО КСЕНОГРАФТА МЕЛАНОМЫ КОЖИ ЧЕЛОВЕКА MEL RAC С МУТАЦИЕЙ NRAS НА ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ МЫШАХ ДЛЯ ДОКЛИНИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ ТАРГЕТНЫХ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СРЕДСТВ

Введение. Разработка новых моделей диссеминированной меланомы кожи человека с наличием молекулярно-генетической мишени для таргетной терапии повышает результативность доклинических исследований in vitro и in vivo новых антимеланомных средств и их комбинаций. Такая возможность реализована путем адаптации к росту in vivo оригинальной линии клеток беспигментной меланомы кожи человека mel Rac и получению подкожного (п/к) ксенографта под контролем трансплантационных, морфологических, молекулярно-генетических (мутация NRAS) и химиотерапевтических (чувствительность к траметинибу, ингибитору NRAS) характеристик. Цель исследования - получение из линии клеток mel Rac п/к ксенографта беспигментной меланомы кожи человека с мутацией NRAS, чувствительной к специфической таргетной терапии. Материалы и методы. Использована линия клеток пигментированной беспигментной меланомы кожи человека mel Rac из коллекции РОНЦ и иммунодефицитные мыши-самки Balb/c nude разведения РОНЦ. Искомые характеристики определены при многократном п/к nрансплантировании in vivo с помощью методов трансплантационной биологии, световой микроскопии, молекулярной генетики и экспериментальной химиотерапии. Чувствительность к ингибитору NRAS мутации оценена под контролем скорости роста опухоли (V/V) по адекватным для пациентов показателям: наличие полной ремиссии и возможность рецидива. Результаты. При п/к трансплантации 10⁷ клеток линии mel Rac получены цитологически идентичные перевиваемые п/к ксенографты с устойчивой кинетикой роста на 4-9-м пассажах (латентная фаза - 8 сут, экспоненциальная - до 14 сут, стационарная - до 24 сут) и наличием мутации NRAS. Траметиниб в разовой дозе 0,3 мг/кг вызвал полную ремиссию в течение 14 сут и в течение 7 сут после его отмены без рецидива. Выводы. Полученный с линией клеток беспигментной меланомы кожи человека mel Rac, чувствительный к траметинибу п/к ксенографт с мутацией NRAS пригоден для доклинического изучения новых противомеланомных средств, направленных на эту мишень.

беспигментная меланома кожи человека, NRAS мутация, подкожный ксенографт, иммунодефицитные мыши, human pigment-free melanoma skin, NRAS mutation, subcutaneous xenograft, immunodeficient mice

1. Демидов Л.В., Орлова К.В. Индивидуализация лекарственного лечения меланомы кожи. Практическая онкология 2013; 14(4): 239-46.

2. Albino A., LeStrange R. Transforming Ras genes from human melanoma: a manifestation of tumor heterogeneity? Nature 1984; 308(5954): 69-72. PMID: 6700714.

3. Colombino M., Capone M., Lissia A. et al. BRAF/NRAS mutation frequencies among primary tumors and metastases in patients with melanoma. J Clin Oncol 2012; 30(20): 2522-9. DOI: 10.1200/JC0.2011.41.2452. PMID: 22614978.

4. Jakob J.A., Bassett R.L. Jr., Ng C.S. et al. NRAS mutation status is an independent prognostic factor in metastatic melanoma. Cancer 2012; 118(16): 4014-23. DOI: 10.1002/cncr.26724. PMID: 22180178.

5. Ascierto P.A., Schadendorf D., Berking C. et al. MEK162 for patients with advanced melanoma harbouring NRAS or Val600 BRAF mutations: a non-randomised, open-label phase 2 study. Lancet Oncol 2013; 14(3): 249-56. DOI: 10.1016/S1470-2045(13)70024-X. PMID: 23414587.

6. Gottardo F., Liu C.G., Ferracin M. et al. Micro-RNA profiling in kidney and bladder cancers. Urol Oncol 2007; 25(5): 387-92. doi: 10.1016/j.urolonc.2007.01.019. PMID: 17826655.

7. Jaiswal B.S., Janakiraman V., Kljavin N.M. et al. Combined targeting of BRAF and CRAF or BRAF and PI3K effector pathways is required for efficacy in NRAS mutant tumors. PLoS One 2009; 4(5): e5717. DOI: 10.1371/journal.pone.0005717. PMID: 19492075.

8. Posch C., Moslehi H., Feeney L. et al. Combined targeting of MEK and PI3K/mTOR effector pathways is necessary to effectively inhibit NRAS mutant melanoma in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci USA 2013; 110(10): 4015-20. DOI: 10.1073/pnas.1216013110. PMID: 23431193.

9. Inma S. Dabrafenib/Trametinib combination approved for advanced melanoma. Published Online: Thursday, January 9, 2014. http://www.onclive.com/web-exclusives/FDA-Approves-First-Ever-Combination-for-Metastatic-Melanoma.

10. Патент РФ № 2402602, 2009. Клеточная линия меланомы человека mel Rac, используемая для получения противоопухолевых вакцин. Михайлова И.Н., Барышников А.Ю., Демидов Л.В. и др. URL: http://www.freepatent.ru/patents/2402602.

11. Трещалина Е.М. Коллекция опухолевых штаммов человека. Под ред. М.И. Давыдова. М., 2009. C. 37-38.

12. Патент РФ № 2364624, 2008. Клеточная линия меланомы человека mel Cher, используемая для получения противоопухолевых вакцин. Михайлова И.Н., Барышников А.Ю., Демидов Л.В. и др. URL: http://www.freepatent.ru/patents/2364624.

13. Трещалина Е.М. Иммунодефицитные мыши разведения ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Возможности использования. М., 2010. С. 26.