Терапевтические дозовые характеристики химерного пептида MM-D37K при парентеральном введении мышам Balb/с nude с колоректальным раком человека НСТ-116

Введение. В рамках конструирования молекул с патогенетической направленностью к опухолевой клетке создан ряд химерных пептидов, включающих функциональный фрагмент с аминокислотной последовательностью из группы SEQ ID NO: 1 - SEQ ID NO: 17 и транспортную последовательность. Эти пептиды при целевой доставке в клетку способны обнаруживать короткие функциональные домены в белках-регуляторах различных функций. Среди них ММ-D37K, блокирующий фазу G1 и индуцирующий апоптоз в клетках опухолей человека, в том числе колоректального рака HCT-116. Этот пептид рассматривается как потенциальный противоопухолевый агент с соответствующими этапами изучения. Цель исследования - изучение дозовых характеристик MM-D37K при парентеральном введении на подкожных (п/к) ксенографтах колоректального рака человека in vivo. Задачи. 1. Изучение эффективности ММ-D37K в диапазоне доз при многократном п/к или внутривенном (в/в) введении мышам Balb/c nude c п/к ксенографтами колоректального рака человека HCT-116. 2. Оценка переносимости ММ-D37K при многократном парентеральном введении мышам с HCT-116. Материалы и методы. Исследования химерного пептида MM-D37K (ингибитор циклинзависимых киназ 4/6) проведены на п/к ксенографтах колоректального рака человека HCT-116у имммунодефицитных мышей Balb/c nude при использовании стандартных критериев оценка эффективности и переносимости и адекватной статистической обработке результатов с использованием непараметрического U-критерия Манна-Уитни. Результаты. Показано, что MM-D37K в разовых дозах 5 или 10 мг/кг при п/к или в/в 5-кратном введении через 48 ч (суммарные дозы 25 или 50 мг/кг соответственно) значимо и достоверно ингибирует рост опухоли в течение 9 дней после окончания лечения на уровне Т/С = 27-43 % (p <0,05) (стандартный критерий Т/С <42 %) при удовлетворительной переносимости. При обоих путях введения выявлена слабая дозовая зависимость как по Т/С, так и по сроку достижения максимального эффекта при индивидуальной чувствительности к пептиду (вариабельность размеров опухолевых узлов при в/в введении большей дозы). Заключение. Полученные данные свидетельствуют о достаточной широте терапевтического действия химерного пептида MM-D37Kна модели колоректального рака человека HCT-116, позволяющей получить значимый достоверный противоопухолевый эффект при парентеральном многократном применении в 2-кратном диапазоне действующих доз.

химерный пептид MM-D37K, колоректальный рак человека, мыши Balb/c nude, эффективность, переносимость, chimeric peptide MM-D37K, human colorectal cancer, mice Balb/c nude, efficacy, tolerance

1. Hirama T., Koeffler H.P. Role of the cyclin-dependent kinase inhibitors in the development of cancer. Blood 1995;86(3):841-54. PMID: 7620180.

2. Aleem E., Kiyokawa H., Kaldis P. CDC2-cyclin E complexes regulate the G1/S phase transition. Nat Cell Biol 2005;7(8):831-36. PMID: 16007079. DOI: 10.1038/ncb1284.

3. Shapiro G.I. Cyclin-dependent kinase pathways as targets for cancer treatment. J Clin Oncol 2006;24(11):1770-83. PMID: 16603719. DOI: 10.1200/JC0.2005.03.7689.

4. Самусенко А.В. Нарушения клеточного цикла и старение клеток в ответ на повреждение ДНК. Вопросы онкологии 2009;55(5):521 -7. PMID: 20020645.

5. Derossi D., Joliot A., Chassaing G., Prochiantz A. The 3rd helix of the antennapedia homeodomain translocates through biological membranes. J Biol Chem 1994;269(14):10444-50. PMID: 8144628.

6. Morris M.C., Depollier J., Mery J. et al. A peptides carrier for the delivery of biologically active proteins in mammalian cells. Nat Biotechnology 2001;19(12):1173-6. PMID: 11731788. DOI: 10.1038/ nbt1201-1173.

7. Харченко В.П., Кулинич Т.М., Лунин В.Г. и др. Цитотоксические свойства химерных пептидов, содержащих активные центры ингибиторов циклиновых киназ. Вопросы онкологии 2007;53(4):448-52. PMID:17969409.

8. Finn R.S., Dering J., Conklin D. et al. PD 0332991, a selective cyclin-D-kinase 4/6 inhibitor, preferentially inhibits proliferation of luminal estrogen receptor-positive human breast cancer cell lines in vitro. Breast Cancer Res 2009;11(5):R77. DOI: 10.1186/bcr2419.

9. de Araujo C.B., Russo L.C., Castro L.M. et al. A novel intracellular peptide derived from G1/S cyclin D2 induces cell death. J Biol Chem 2014;289(24):16711-26. PMID 24764300.

10. Bhattacharya S., Ray R.M., Johnson L.R. Cyclin-dependent kinases regulate apoptosis of intestinal epithelial cells. Apoptosis 2014;19(3):451-66. DOI: 10.1007/s10495-013-0942-3.

11. Aleem E., Arceci R.J. Targeting cell cycle regulators in hematologic malignancies. Front Cell Dev Biol 2015;3:16. PMID: 25914884. DOI: 10.3389/fcell.2015.00016.

12. Имянитов Е.Н. Эволюция системного лечения гормонозависимого рака молочной железы: от чередования препаратов к комбинированной терапии. Опухоли женской репродуктивной системы 2016;12(2): 46-51.

13. Bozhenko V.K., Kulinich T.M., Kudinova E.A. et al. New targeted anti CDK4/6 peptide MM-D37K. J Clin Oncol 2013;31:e13545.

14. Патент РФ № 2435783. 2011 г. Боженко В.К. Химерный пептид и фармацевтическая композиция для лечения онкологических заболеваний.

15. Патент PCT/RU2014/000199 WO2014163535 A1. 2014 г. Боженко В.К. Химерный пептид и фармацевтическая композиция для лечения онкологических заболеваний.

16. Трещалина Е.М. Иммунодефицитные мыши разведения РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Возможности использования. М.: Издательская группа РОНЦ, 2010. С. 16.

17. Трещалина Е.М. Коллекция штаммов опухолей человека. Под ред. М.И. Давыдова. М.: Практическая медицина, 2009. С. 88-90.

18. Трещалина Е.М. Методические рекомендации по доклиническому изучению противоопухолевой активности лекар ственных средств. В кн.: Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. С. 642-657.

19. Европейская конвенция по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей. ЕЭС, Страсбург, 1985. Ланималогия 1993;1:29.

20. Большаков О.П. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных. ВОЗ 2000. Рекомендации комитетам по этике, проводящим экспертизу биомедицинских исследований. Качественная клиническая практика 2002;9:1-15. PMID: 27296126. 2'2017 том 16 I vol. 16