Preview

Российский биотерапевтический журнал

Расширенный поиск

Масштабирование технологии получения липосомальной формы тетра-3-фенилтиофталоцианина гидроксиалюминия и изучение ее мутагенных и иммунотоксических свойств

https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-83-94

Полный текст:

Аннотация

Применение липосом в качестве систем доставки лекарственных средств в организм человека сегодня является признанным подходом к повышению эффективности лечения. По сравнению с другими наноразмерными носителями липосомы отличаются высокой биосовместимостью. Однако в литературных источниках имеется ряд данных об иммуногенности некоторых липосомальных препаратов. Проявления реакции гиперчувствительности средней и тяжелой степени отмечены у части пациентов при внутривенном введении липосом Doxil®, Ambisome®, DaunoХome®. Технология производства липосом – достаточно трудоемкий процесс, поэтому получение липосомальных лекарственных форм (ЛЛФ) в промышленных масштабах для проведения доклинических и клинических исследований проблематично для исследователей и производителей всего мира. В связи с этим актуальным представляется проведение исследований специфической токсичности липосомальных препаратов и масштабирования технологии получения липосом. Цель исследования – оценка качества опытных образцов ЛЛФ на основе тетра-3-фенилтиофталоцианина гидроксиалюминия, полученных по масштабированной технологии, в сравнении с образцами, произведенными в лабораторных условиях, а также изучение их мутагенных и иммунотоксических свойств. Объект исследования – тетра-3-фенилтиофталоцианин гидроксиалюминия липосомальный, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 1,5 мг, во флаконах вместимостью 20 мл. Материалы и методы. В работе использовались метод Бенгема, экструзия, стерилизующая фильтрация, лиофилизация; тест на нарушение целостности межклеточных контактов (на промоторную активность), бактериальный тест Эймса, цитогенетическое исследование по учету хромосомных аберраций, тест на способность вызывать повреждение ДНК (тест ДНК-комет), метод Ерне; реакция гиперчувствительности замедленного типа, определение массы и клеточности центральных и периферических органов иммунитета, оценка фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов. Результаты. По результатам проведенных исследований масштабирована технология получения ЛЛФ, позволяющая получать до 400 флаконов ЛЛФ за один производственный цикл. Установлено, что ЛЛФ в дозах 6 и 24 мг/кг не увеличивает количество хромосомных аномалий у мышей и не вызывает повреждений ДНК, в дозах 1,1–22,0 мкг/чашка не проявляет мутагенной активности в бактериальном тесте Эймса, в диапазоне концентраций 0,062–3,1 мкг в тесте на промоторную активность не разобщает межклеточные контакты. Определено, что ЛЛФ в дозах 6 и 12 мг/кг при 1-кратном внутривенном введении не оказывает влияния на гуморальный и клеточный иммунные ответы, не изменяет массу и клеточность центральных и периферических органов иммунной системы. ЛЛФ через 24 ч после введения в дозах 6 и 12 мг/кг дозозависимо снижает фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов, которая восстанавливается через 7 сут. Заключение. Масштабирована технология получения ЛЛФ. В исследуемых дозах установлено отсутствие у ЛЛФ способности промотировать процесс канцерогенеза и влиять на гуморальный и клеточный иммунные ответы.

Об авторах

А. В. Ланцова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Л. Л. Николаева
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

Людмила Леонидовна Николаева 



Н. А. Оборотова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Е. В. Санарова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


О. Л. Орлова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Н. В. Голубцова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


А. А. Рудакова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


З. А. Соколова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


К. И. Кирсанов
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Е. А. Лесовая
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Л. Р. Тилова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Список литературы

1. Maeda H.,WuJ.,Sawa T.et al.Tumor vascular permeability and the EPR effect in macromolecular therapeutics: a review. J Control Rel 2000; 65:271–84. doi:10.1016/S0168-3659(99)00248-5.

2. Wick P.,Manser P.,Limbach L.K.et al. The degree and kind of agglomeration affect carbon nanotube cytotoxicity. Toxicol Lett 2007; 168(2):121–31. doi:10.1016/j.toxlet.2006.08.019.

3. Ziemba B.,Matuszko G., Bryszewska M.,Klajnert B. Influence of dendrimers on red blood cells. Cell Moll Biol Lett 2012; 17(1):21–35. doi:10.2478/s11658-011-0033-9.

4. Аляутдин Р.Н.,Романов Б.К. Рекомендации по оценке безопасности лекарственных средств,содержащих наночастицы. Безопасность и риск фармакотерапии 2015; 4:10–22.

5. Szebeni J.,Muggia F.,Gabizon A., Barenholz Y.Activation of complement by therapeutic liposomes and other lipid excipient-based therapeutic products: prediction and prevention. Adv Drug Deliv Rev 2011;63(12):1020–30. doi:10.1016/j.addr.2011.06.017.

6. Brissette J.L.,Kumar N.M.,Gilula N.B., Dotto G.P. The tumor promoter 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate and the ras oncogene modulate expression and phosphorylation of gap junction proteins. Mol Cell Biol 1991; 11:5364–71.

7. Abbaci M.,Barberi-Heyob M.,Blondel W. et al. Advantages and limitations of commonly used methods to assay the molecular permeability of gap junctional intercellular communication .BioTechniques 2008; 45:33–46. doi:10.1128/MCB.11.10.5364.

8. Na M.R.,Koo S.K.,Kimd.Y. et al.In vitro inhibition of gap junctional intercellular communication by chemical carcinogens. Toxicology 1995; 98:199–206. doi:10.1016/0300-483X(94)02931-J.

9. Maron D.M.,Ames B.N. Revised methods for the Salmonella mutagenicity test. Mutat Res 1983;113(3–4):173–215. doi:10.1016/0165-1161(83)90010-9.

10. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Методические указания по оценке мутагенных свойств фармакологических препаратов. М.: ГрифиК, 2012. Ч.1. 944с.

11. Белицкий Г.А.,Ревазова Ю.А., Абилев С.К. и др. Методические рекомендации по исследованию канцерогенных свойств фармакологических и лекарственных средств. Ведомости Фармакологического комитета 1998; 1:21–4.

12. Фонштейн Л.М.,Абелев С.К., Бобринев Е.В. и др. Методы первичного выявления генетической активности загрязнителей среды спомощью бактeриальных тест-систем (Методические указания). М.,1983.34с.

13. Ford C.E.,Hamerton J .L. Chromosomes of five rodent species. Nature 1956; 31:247–54.

14. Оценка генотоксических свойств методом ДНК-комет in vitro. Методические рекомендации. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора,2010.

15. Olive P.L.,Banath J.P. The comet assay: a method to measure DNA damage in individual cells. Nat Protoc 2006; 1(1):23–9. doi:10.1038/nprot.2006.5.

16. Budunova I.V., Mittelman L.A., Belitsky G.A. Identification of tumor promoters by their inhibitory effect on intercellular transfer of lucifer yellow. Cell Biol Toxico l1989;5(1):77–89. doi:10.1007/BF00141066.

17. Ostling O.,Johanson K.J. Microelectrophoretic study of radiation-induced DNA damage in individual mammalian cells. Biochem Biophys Res Commun 1984;123:291–8. doi:10.1016/0006-291X(84)90411-X.

18. Иванова А.С.,Мастернак Т.Б., Мартынов А.И. Принципы изучения иммунотоксического действия фарма кологических препаратов. Токсикологический вестник 2010;5:26–31.

19. Иванова А.С.,Мастернак Т.Б.,Малкина Е.Ю., Мартынов А.И. Принципы оценки иммунологической безопасности фармацевтических продуктов. Биомедицина 2011;(3):94–7.

20. Jerne N.K., Nordin A.A. Plaque formation in agar by single antibody-producing cells. Science 1963;140:405.

21. Подоплелов И.И.,Крылов О.Р., Медуницын Н.В. Эванс синий как адъювант для получения повышенной чувствительности замедленного типа в эксперименте. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 1985;6:729.

22. Raz A.,Bucana C.,Fogler W.E.et al. Biochemical,Morphological,and Ultrastructural Studies on the Uptake of Liposomes by Murine Macrophages. Cancer Res 1981;41:487–94.PMID:7448797.


Для цитирования:


Ланцова А.В., Николаева Л.Л., Оборотова Н.А., Санарова Е.В., Орлова О.Л., Голубцова Н.В., Рудакова А.А., Соколова З.А., Кирсанов К.И., Лесовая Е.А., Тилова Л.Р. Масштабирование технологии получения липосомальной формы тетра-3-фенилтиофталоцианина гидроксиалюминия и изучение ее мутагенных и иммунотоксических свойств. Российский биотерапевтический журнал. 2018;17(1):83-94. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-83-94

For citation:


Lantsova A.V., Nikolaeva L.L., Oborotova N.A., Sanarova E.V., Orlova O.L., Golubtsova N.V., Rudakova A.A., Sokolova Z.A., Kirsanov K.I., Lesovaya E.A., Tilova L.R. Scaling of the technology of obtaining the hydroxyaluminium tetra-3-phenylthiophthalocyanine liposomal form and studying its mutagenic and immunotoxic properties. Russian Journal of Biotherapy. 2018;17(1):83-94. (In Russ.) https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-83-94

Просмотров: 49


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1726-9784 (Print)
ISSN 1726-9792 (Online)