Preview

Российский биотерапевтический журнал

Расширенный поиск

Аффинные свойства анти-her2 антител, полученных из растительного источника

https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-95-100

Полный текст:

Аннотация

Рецептор Her2 является важной мишенью противоопухолевой терапии при лечении рака молочной железы. В настоящее время в клинической практике применяют препарат на основе моноклональных антител анти-Her2 – трастузумаб. Трастузумаб производится в культуре животных клеток и стоит достаточно дорого. Разработана технология продукции рекомбинантных антител в растительном продуценте Nicotiana benthamiana с высоким выходом очищенного белка. Цель исследования – сравнение аффинных свойств рекомбинантных антител, полученных классическим способом в культуре клеток и полученных в растительной биомассе. Материалы и методы. Рекомбинантные фитоантитела выделяли методом аффинной хроматографии из биомассы растений N. benthamiana, агроинфильтрованных векторными конструкциями. Сравнение аффинных свойств проводили методами иммуноцитохимической окраски клеток, конкурентного связывания нативным эпитопом с анализом методом проточной цитофлуориметрии. Результаты и заключение. В данной работе нами установлено, что антитела, экспрессированные в N. benthamiana, не уступают аналогам, полученным из клеток млекопитающих, в связывании антигена Her2 на поверхности мембран клеток SK-BR-3. В настоящей работе впервые показано, что полученные фитоантитела анти-Her2 не отличаются от трастузумаба по специфичному связыванию с антигеном Her2, а также с IV субдоменом рецептора Her2.

Об авторах

А. И. Щербаков
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Е. Н. Кособокова
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


М. В. Пинюгина
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия
115478 Москва, Каширское шоссе, 24


Е. В. Шешукова
ФГБУН Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН
Россия
119991 Москва, ул. Губкина, 3


В. С. Косоруков
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

Вячеслав Станиславович Косоруков




Список литературы

1. Давыдов М.И. Структура заболеваемости злокачественными новообразованиями населения России в 2008 г. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН 2010;21(2):52.

2. Чиссов В.И. Злокачественные новообразования в России в 2010 году (заболеваемость и смертность). М.: ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздравсоцразвития России, 2012. 260 с.

3. Hudziak R.M., Lewis G.D., Winget M. et al. p185HER2 monoclonal antibody has antiproliferative effects in vitro and sensitizes human breast tumor cells to tumor necrosis factor. Mol Cell Biol 1989;3:1165–72. DOI: 10.1128/MCB.9.3.1165.

4. Komarova T.V., Kosorukov V.S., Frolova O.Y. et al. Plant-made trastuzumab (herceptin) inhibits HER2/Neu+ cell proliferation and retards tumor growth. PLoS One 2011:e17541. DOI: 10.1371/journal.pone.0017541.

5. Кособокова Е.Н., Пинюгина М.В., Косоруков В.С. Получение биологически активного интерферона-а-2b человека из растений Nicotiana benthamiana. Биотехнология 2015;4:52–61.

6. Steplewski Z., Sun L.K., Shearman C.W. et al. Biological activity of human – mouse IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4 chimeric monoclonal antibodies with antitumor specificity. Proc Natl Acad Sci USA 1988;85(13):4852–6. PMID: 3387441.

7. Косоруков В.С., Скрыпник К.А., Трещалина Е.М., Андронова Н.В. Противоопухолевое действие субстанции рекомбинантных антител против онкоантигена HER2/neu, полученной из растительного продуцента. Российский биотерапевтический журнал 2012;11(2):4.

8. Dorokhov Y.L., Frolova O.Y., Skurat E.V. et al. A novel function for a ubiquitous plant enzyme pectin methylesterase: the enhancer of RNA silencing. FEBS Lett 2006;580:3872–8. DOI: 10.1016/j.febslet.2006.06.013.

9. Komarova T.V., Sheshukova E.V., Kosobokova E.N. et al. Trastuzumab and pertuzumab plant biosimilars: Modification of Asn297-linked glycan of the mAbs produced in a plant with fucosyltransferase and xylosyltransferase gene knockouts. Biochemistry (Moscow) 2017;82(4):510–20. DOI: 10.1134/S0006297917040137.

10. Косоруков В.С., Кособокова Е.Н., Пинюгина М.В. и др. Биологическая активность рекомбинантных антител против рецептора Her2, полученных из растительного источника. Российский биотерапевтический журнал 2015;14(2):105–12.


Для цитирования:


Щербаков А.И., Кособокова Е.Н., Пинюгина М.В., Шешукова Е.В., Косоруков В.С. Аффинные свойства анти-her2 антител, полученных из растительного источника. Российский биотерапевтический журнал. 2018;17(1):95-100. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-95-100

For citation:


Scherbakov A.I., Kosobokova E.N., Pinyugina M.V., Sheshukova E.V., Kosorukov V.S. Аffinity properties of plant-made anti-her2 antibodies. Russian Journal of Biotherapy. 2018;17(1):95-100. (In Russ.) https://doi.org/10.17650/1726-9784-2018-17-1-95-100

Просмотров: 246


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1726-9784 (Print)
ISSN 1726-9792 (Online)