Клетки врожденного иммунитета в модели острого псориазоподобного воспаления у мышей

Введение. Экспериментальные модели псориаза на животных помогли выяснить функции воспалительных медиаторов, раскрыть вклад врожденных или адаптивных иммунных механизмов, кератиноцитов в развитие и поддержание воспаления при псориазе.

Цель исследования – изучить субпопуляционный состав иммунных клеток крови, кожи, лимфоидных органов и сравнить 2 метода изоляции клеток из кожи.

Материалы и методы. В исследование включены 46 мышей линии C57BL / 6, которые разделены на 2 группы: опытную (n = 24) для воспроизведения модели острого псориазоподобного дерматита с помощью имихимод-крема 5 % (62,5 мг / см2 / сут / мышь, 7 дней) и контрольную (n = 22). Оценку тяжести воспаления кожи осуществляли по балльной шкале. На 7-й день исследовали кожу, селезенку, лимфатические узлы (ЛУ), тимус мышей. Для изоляции клеток из кожи применяли метод спонтанной миграции и ферментативной диссоциации с помощью коллагеназы. Оценку субпопуляционной структуры мононуклеарных клеток проводили методом проточной цитометрии с применением моноклональных антител против соответствующих антигенов (СD3, CD4, CD8, CD5, MHC II класса, γδ-TCR, CD38, CD80, CD83, CD86, TLR2). Статистическая обработка проведена при помощи программного пакета winMDI 2.8.

Результаты. Показано, что для иммунофенотипирования γδ-Т-лимфоцитов, дендритных клеток CD86⁺, CD83⁺, CD83⁺CD86⁺ применимы оба метода изоляции клеток кожи. Выявлено снижение экспрессии TLR2 на клетках крови и повышение на клетках ЛУ и кожи. В ЛУ, тимусе отмечено выраженное повышение числа CD38⁺, повышение γδ-Т-лимфоцитов – в ЛУ и крови. В коже показана инфильтрация γδ-Т-лимфоцитами, CD8⁺- и CD38⁺-клетками.

Заключение. Острое псориазоподобное воспаление у мышей сопровождалось повышением количества γδ-Тклеток в крови, ЛУ и коже. Наблюдалась инфильтрация кожи CD8⁺- и CD38⁺-клетками. Оба метода изоляции клеток – метод спонтанной миграции и метод ферментативной диссоциации – оказались применимы для дальнейшего иммунофенотипирования.

1. Moos S., Mohebiany A.N., Waisman A., Kurschus F.C. Imiquimod-induced psoriasis in mice depends on the IL-17 signaling of keratinocytes. J Invest Dermatol 2019;139(5):1110–7. DOI: 10.1016/j.jid.2019.01.006

2. Singh T.P., Zhang H.H., Hwang S.T., Farber J.M. IL-23- and imiquimod-induced models of experimental psoriasis in mice. Curr Protoc Immunol 2019;125(1):e71. DOI: 10.1002/cpim.71

3. van der Fits L., Mourits S., Voerman J.S. et al. Imiquimod-induced psoriasis-like skin inflammation in mice is mediated via the IL-23/IL-17 axis. J Immunol 2009;182(9):5836–45. DOI: 10.4049/jimmunol.0802999

4. Sun J., Zhao Y., Hu J. Curcumin inhibits imiquimod-induced psoriasis-like inflammation by inhibiting IL-1beta and IL-6 production in mice. PLoS One 2013;8(6):e67078. DOI: 10.1371/journal.pone.0067078

5. Di T.T., Ruan Z.T., Zhao J.X. et al. Astilbin inhibits Th17 cell differentiation and ameliorates imiquimod-induced psoriasis-like skin lesions in BALB/c mice via Jak3/Stat3 signaling pathway. Int Immunopharmacol 2016;32:32–8. DOI: 10.1016/j.intimp.2015.12.035

6. Baek J.O., Byamba D., Wu W.H. et al. Assessment of an imiquimod-induced psoriatic mouse model in relation to oxidative stress. Arch Dermatol Res 2012;304(9):699–06. DOI: 10.1007/s00403-012-1272-y

7. Meng Y., Wang M., Xie X. et al. Paeonol ameliorates imiquimod-induced psoriasis-like skin lesions in BALB/c mice by inhibiting the maturation and activation of dendritic cells. Int J Mol Med 2017;39(5):1101–10. DOI: 10.3892/ijmm.2017.2930

8. Zhao J., Di T., Wang Y. et al. Multi-glycoside of Tripterygium wilfordii Hook. f. ameliorates imiquimod-induced skin lesions through a STAT3-dependent mechanism involving the inhibition of Th17-mediated inflammatory responses. Int J Mol Med 2016;38(3):747–57. DOI: 10.3892/ijmm.2016.2670

9. Li Y., Zhang G., Chen M. et al. Rutaecarpine inhibited imiquimod-induced psoriasis-like dermatitis via inhibiting the NF-kappaB and TLR7 pathways in mice. Biomed Pharmacother 2019;109:1876–83. DOI: 10.1016/j.biopha.2018.10.062

10. Guillaume P., Lepage M., Goineau S. et al. Preclinical evaluation of anti-psoriasis activity using the imiquimod-induced inflammation test in the mouse. J Invest Dermatol 2015;135(Suppl. 2):078.

11. Piedra-Quintero Z.L., Wilson Z., Nava P., Guerau-de-Arellano M. CD38: An immunomodulatory molecule in inflammation and autoimmunity. Front Immunol 2020;11:597959. DOI: 10.3389/fimmu.2020.597959