ХАРАКТЕРИСТИКА МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ В КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ МЕТАСТАТИЧЕСКОЙ МЕЛАНОМЫ КОЖИ

МЛУ является основным препятствием эффективности химиотерапии. В опухолевых клетках МЛУ может развиваться в ответ на действие даже одного цитостатического агента. Целью настоящей работы была характеристика МЛУ в клеточных линиях метастатической меланомы кожи человека, полученных в ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Экспрессию гликопротеина pgpl70 определяли в реакции иммунофлуоресценции, мРНК генов МЛУ определяли методом ОТ-ПЦР, выброс родамина 123 оценивали на проточном цито ф лу о р и метре, цитотоксическую активность определяли в МТТ-тесте. Определение чувствительности клеток к цитотоксическому действию аранозы показало, что клетки меланомы человека mel Ког чувствительны к действию препарата, а клетки mel Ibr и mel MtpX-устойчивы. В реакции иммунофлуоресценции было обнаружено, что от 35 до 50 % клеток линии mel Ibr экспрессировали pgpl70. Клетки mel Ког в. mel MtpX не экспрессировали Р-гликопротеин. В ПЦР определяли мРНК генов, ответственных за множественную лекарственную устойчивость - MDR1, BCRP, МЕРІ и LRP (МѴР). Во всех образцах линий клеток мРНК генов BCRP и МЕРІ экспрессируются слабо, а экспрессию мРНК гена LRP (МѴР) не удалось увидеть. мРНК гена YB1 экспрессируется хорошо, что характерно для опухолевых клеток, мРНК этого гена обнаружили в клетках mel MtpX и субклонах линии mel Ibr. Клетки линии mel Ког не содержат мРНК гена MDR1. Исследование выброса родамина 123 (Rhl23) из клеток показало, что контрольные клетки mel Ког накапливали Rhl23 и не выбрасывали его. Клетки линии mel Ibr накапливали Rhl23 и половину выбрасывали. Клетки линии mel MtpX накапливали мало родамина 123 и почти весь выбрасывали. Таким образом, исследование показало, что чувствительные к аранозе клетки линии mel Ког не экспрессируют pgpl70, не содержат мРНК генов МЛУ и не выбрасывают Rhl23. Резистентные к цитотоксическому действию аранозы клетки mel Ibr экспрессируют pgpl70, содержат мРНК гена MDR1, выбрасывают Rhl23. Однако устойчивые к аранозе клетки линии mel MtpX не экспрессируют pgpl70, но содержат мРНК гена MDR1 и активно выбрасывают Rhl23.

клеточные линии меланомы человека, множественная лекарственная устойчивость, липосомы, гликопротеин pgp 170, ген MDR1, the human melanoma cell tines, multi-drug resistance, liposomes

1. Барышников А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака // Бюллетень Сибирского отделения РАМН. - 2004. - №

2. -С. 59-63.

3. Барышников А.Ю., Степанова Е.В. Молекулярные биомаркеры в диагностике лекарственной резистентности // Аллергия, астма и клиническая иммунология. - 2009. - № 1. - С. 23.

4. Барышникова МА., Грищенко Н.В., Бурова О.С. и др. Роль CD95/Fas рецептора в индукции апоптоза противоопухолевыми препаратами//Российский биотерапевтический журнал. -2014. -Т. 13, № 3. -С. 3-8.

5. Барышникова МА., Грищенко НВ., Полозкова А.П. Влияние лекарственных форм аранозы на индукцию апоптоза // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, № 1. - С. 64.

6. Блохин Д.Ю., Соколовская А А., Власенкова Н.К. и др. Множественная лекарственная устойчивость опухолевых клеток, резистентных к апоптозу // Вестник РАМН. - 2007. - № 10. - С. 41-6.

7. Богуш ТА., Смирнова ГБ., Богуш ЕА., Барышников АЮ. Маркеры множественной лекарственной резистентности солидных опухолей человека: методические, фундаментальные и клинические аспекты // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5, № 3. - С. 82-92.

8. Богуш ТА., Гришанина АН., Богуш ЕА. и др. Влияние АВС -транспортеров на противоопухолевую терапию рака толстой кишки // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2006. - Т. 16, № 2. - С. 55-62.

9. Богуш Т.А., Дудко Е А., Богуш Е А., Барышников АЮ. Характеристика взаимодействия специфических антител с PGP в клетках Т-лимфобластного лейкоза линии JURKAT // Антибиотики и химиотерапия. - 2009. -Т. 54, № 1-2. - С. 3-9.

10. Грищенко НВ., Альбассит Б., Барышникова МА.и др. Сравнение цитотоксического действия двух лекарственных форм противоопухолевых препаратов из класса нитрозомочевины // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, №1.-С. 49-54.

11. Грищенко Н.В., Барышникова МА., Полозкова АЛ. и др. Липосомальные противоопухолевые препараты не используют СБ95-зависимый сигнальный путь апоптоза // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, № 1. - С. 37-42.

12. Козеев С.Г., Барышникова МА., Афанасьева Д.А. и др. Сравнение цитотоксического действия двух лекарственных форм аранозы // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11, № 2. - С. 24.

13. Ланцова А.В., Барышникова МА., Санарова ЕВ. Изучение в системе in vitro наноструктурированной лекарственной формы лизомустина//Российский биотерапевтический журнал. -2012. -Т.11,№2. -С. 31.

14. Литвяков Н.В. Градиентный феномен экспрессии генов множественной лекарственной устойчивости в опухоли молочной железы при проведении неоадьювангной химиотерапии: связь с прогрессированием заболевания // Сибирский онкологический журнал. - 2013. - Т. 58, № 4. - С. 5.

15. Михайлова НН., Лукашина МИ., Барышников АЮ. и др. Клеточные линии меланомы - основа для создания противоопухолевых вакцин // Вестник РАМН. 2005. - № 7. - С. 37-40.

16. Михайлова НН., Ковалевский ДА. Бурова О.С. и др. Экспрессия раково-тестируемых антигенов в клетках меланомы человека // Сибирский онкологический журнал. - 2010. - Т. 37, № 1. - С. 29-39.

17. Михайлова ТВ, Барышникова МА., Клименко О В. и др. Разработка липосомальной формы противоопухолевой вакцины//Российский биотерапевтический журнал. -2011. -Т.10,№4. -С. 61-6.

18. Михайлова ТВ., Барышникова МА., Бурова О.С. и др. Сравнение уровня экспрессии HSP70 на клеточных линиях меланомы // Российский биотерапевтический журнал. - 2010. - Т. 9, № 1. - С. 43-8.

19. Славина Е.Г., Бигвава ХА., Заботина ТН. и др. Модификация фактором некроза опухоли (ФНО-альфа) цитотоксического и апоптотического действия противоопухолевых лекарств в клетках меланомы человека // Российский биотерапевтический журнал. - 2009. - Т. 8, № 4. - С. 37-44.

20. Шоуа И Б., Полозкова АЛ., Оборотова НА. и др. Действие липосомального доксорубицина на клетки линии, экспрессирующие активный pgpl70 // Российский биотерапевтический журнал. - 2004. - Т. 3, № 1. - С. 20-3.

21. Szakass G., Paterson J.K., Ludwing J.A. et al. Targetting multidrug resistance in cancer // Nan Rev Drug Discov. - 2006. - № 5. -P.219-34.

22. Sokolovskaya A.A., Zabotina T.N., Blokhin D. Yu. et al. Comparative analysis of apoptosis induced by various anticancer drags in Jurkat cells // Experimental Oncology. - 2001. - 1(23). - P. 46-50.

23. Sokolovskaya 4.4., Zabotina T.N., Blokhin D. Yu. et al. CD95-dificient cells of Jurkat/A4 subline are resistant to drug-induced apoptosis//Experimental Oncology. -2001. - 3(23). -P. 175-81.

24. Stavrovskaya 4.4., Sedyakhina N.P., Stromskaya T. etal. Prognastic value of P-glicoprotein and correlation with CD34 antigen // British J. Heamatology. - 1998. - 5-6(28). - P. 469-82.

25. Turkina A.G., Baryshnikov A. Yu., Sedyakhina N.P. et al. Studies of P-glycoprotein in chronic myelogenousleukaemia patients: Expression, activity and correlations with CD34 antigen // British J. Heamatology. - 1996. - 92. - P. 88-96.

26. Turkina A.G., Zabotina T.N., Kusnetzov S. V. et al. Studies of some mechanisms of drag resistance in chronic myeloid leukemia (CML) // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 1999. - 457. - P. 477-88.