ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БИОМОДИФИІДОРОВАІIIІОІ О ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА - L-АСПАРАГИНАЗЫ WAS79

На неинбредных крысах, самках и самцах, проведено токсикологическое изучение L-аспарагиназы Was 79, полученной путем модификации природного фермента Wolinella succinogenes в ФГУП «ГосНИИгенетика». L- аспарагиназу вводили внутрибрюшинно в 1 и 10 терапевтических дозах (1200 и 12000 МЕ/кг) ежедневно в течение 15 суток. В ходе исследования определяли массу тела животных, проводили клинический и биохимический анализы крови, анализ мочи, снимали ЭКГ. На 1 и 15 сутки после окончания ку рса по пять животных из каждой группы подвергали эвтаназии. При вскрытии макроскопически оценивали состояние внутренних органов, определяли массовые коэффициенты сердца, печени, почек, селезенки и тимуса, проводили патоморфологическое исследование внутренних органов. Проведенное исследование показало, что применение L-аспарагиназы не оказывает влияния на массу тела животных, показатели клинического и биохимического анализов крови, анализа мочи. Гемато-, нефро-, панкреа-, и гастроинтестинальная токсичность проявляются только при патоморфологическом исследовании. Гепатотоксичность, выявленная при микроскопическом изучении, была подтверждена результатами биохимического анализа сыворотки крови, который показал значительное увеличение уровней АЛТ и щелочной фосфатазы в обеих группах животных, получавших L-аспарагиназу. Обнаруженные изменения были обратимы и зависели от дозы препарата.

L-аспарагиназа, Wolinella succinogenes, хроническая токсичность, крысы, L-asparaginase, Wolinella succinogenes, chronic toxicity, rats

1. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - 4.1. -С. 13-24.

2. Соколов М.А., Эльдаров М.В. Покровская С.С. и др. Бактериальные рекомбинантные l-аспарагиназы: свойства, строение и антипролиферативная активность // Биомедицинская химия. - 2015. - Т. 61, № 3. - С. 312-24.

3. Bendich A., Kafkewitz !)., Abuchowsld A., Davis F.F. Immunological effects of native and polyethylene glycol-modified asparaginases from Vibrio succinogenes and Escherichia coli in normal and tumour-bearing mice // Clin. Exp. Immunol. - 1982.-48.-P. 273-8.

4. Derst C., Henseling J., Rohm K.H. Engineering the substrate specificity of Escherichia coli asparaginase II. Selective reduction of glutaminase activity by amino acid replacements at position // Protein Science. - 2000. - P. 2009-17.

5. Distasio J.A., Niederman R.A., Kafkewitz D., Goodman D. Purification and characterization of 1-asparaginase with antilymphoma activity from Vibrio succinogenes // J. Biol. Chem. - 1976. - 251(69). - P. 29-33.

6. Distasio J.A., Niederman R.A., Kafkewitz D. Antilymphoma activity of a glutaminase-free L-asparaginase of microbial origin // Exp Biol Med. - 1977. - 155(26). - P. 528-31.

7. Distasio J.A., Salazar A.M., Nadji M., Durden D.L. Glutaminase-Free Asparaginase From Vibrio Succinogenes: An Antilymphoma Enzyme Lacking Hepatotoxicity // Znt. J. Cancer. - 1982. - 30. - P. 343-7.

8. Durden D.L., Distasio J.A. Characterization of the effects of asparaginase from Escherichia coli and a glutaminase free asparaginase from Vibrio succinogenes on specific cell-mediated cytotoxicity // Int. J. Cancer. - 1981. - 27. - P. 59-65.

9. Durden D.L., Salazar A.M., Distasio J.A. Kinetic analysis of hepatotoxicity associated with antineoplastic asparaginases // Cancer Res. - 1983. - 43. - P. 1602-5.

10. European Convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (Council of Europe, ETS No. 123).-1986.

11. Freireich E.J., Gehan E.A., Rail D.P. et al. Quantitative comparison of toxicity of anticancer agents in mouse, rat, dog, monkey and man // Cancer Chemother. Repts. - 1966. - 50(4). - P. 219-44.

12. Haskell S.M., Canellos G.P., Leventhal B.G. et al. L-asparaginase: therapeutic and toxic effects in patients with neoplastic disease //New Engl. J. Med. - 1969. - 281. - P. 1028-34.

13. Khan A., AdachiM., Hill J.M. Diabetogenic effect of L-asparaginase // J. Clin. Endocrinol. & Metab. - 1969. - 29. - P. 1373-9.

14. Lubkowski J., Palm G.J., Gilliland G.L. et al. Crystal structure and amino acid sequence of Wolinella succinogenes L- asparaginase//Eur. J. Biochem. - 1996. -241. -P. 201-7.

15. Ollenschlager G^ Roth E., Linkesch W. et al. Asparaginase-induced derangements of glutamine metabolism: the pathogenetic basis for some drug-related side-effects //Eur. J. Clin. Invest. - 1988. - 18(5). -P. 512-6.

16. Plourde P. V, Jeha S., Hijiya N. et al. Safety profile of asparaginase Erwinia chrysanthemi in a large compassionate-use trial // Pediatric Blood & Cancer. - 2014. - 61(7). -_P. 1232-8.

17. Reinert R.B., Oberle L.M., Wek S.A. et al. Role Of Glutamine Depletion In Directing Tissue-Specific Nutrient Stress Responses To L-Asparaginase // J. Biol. Chem. - 2006. - 281. -P. 31222-33.

18. Storti E., Quaglino D. Dysmetabolic and neurologic complications in leukemic patients treated with L-asparaginase. In Experimental and clinical Effects of L-asparaginase. New York, Springer-Verlang, 1970. - P. 344-9.

19. Wintrobe MM. Clinical hematology, ed. 6, - Philadelphia, Lea & Febiger, 1969. - P. 1044.

20. Zubrod C.G. The clinical toxicities of L-asparaginase in treatment of leukemia and lymphoma // Pediat. - 1970. - 45. - P. 555-9.