Иммунофлуоресцентный анализ экспрессии бета-III тубулина в опухолевой и окружающей нормальной ткани пациентов с немелкоклеточным раком легкого

Введение. Бета-IIIтубулин (TUBB3) - одна из 8 изоформ белка микротрубочек бета-тубулина, экспрессирующаяся в организме взрослого человека исключительно в нейронах и клетках Сертоли. В то же время экспрессия TUBB3 выявляется в клетках солидных опухолей, в частности немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), где его экспрессию обычно связывают с неблагоприятным прогнозом и устойчивостью к терапии препаратами платины и таксанами. Цель исследования - проверка выдвинутой нами гипотезы, что TUBB3 может экспрессироваться не только в первичном опухолевом узле, но и за его пределами. Исследовано 60 хирургических биопсийньх образцов немелкоклеточного рака легкого и морфологически нормальной окружающей ткани 30пациентов, оперированных в ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Материалы и методы. Образцы переводили в одноклеточную суспензию, фильтровали, фиксировали в 4 % растворе формальдегида, окрашивали моноклональными антителами к TUBB3 и анализировали методом проточной цитофлуориметрии, разработанным в лаборатории медицинской химии НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей РОНЦ им. Н.Н. Блохина и запатентованным. Результаты. Экспрессия TUBB3 в группе образцов НМРЛ была выше, чем в группе образцов морфологически нормальной ткани. Тем не менее в подавляющем большинстве образцов морфологически нормальной ткани (25 из 30) TUBB3 экспрессировался, достигая значения в 39 % окрашенных клеток. Выводы. В целом, полученные данные свидетельствуют о принципиальной возможности присутствия ТиВВ3-позитивных клеток за пределами первичной опухоли - в ткани, визуально не вовлеченной в опухолевый процесс.

немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), нормальная ткань легкого, бета-III тубулин (TUBB3), проточная цитофлуориметрия, non-small cell lung carcinoma (NSCLC), normal lung tissue, class IIIbeta-tubulin (TUBB3), flow cytometry

1. Nogales E. Structural insights into microtubule function. Annu Rev Biochem 2000;69:277-302. PMID:10966460.

2. Leandro-Garcia L.J., Leskela S., Landa I. et al. Tumoral and tissue-specific expression of the major human beta-tubulin isotypes. Cy-toskeleton (Hoboken) 2010;67(4):214-23. doi: 10.1002/cm.20436. PMID: 20191564.

3. Jakobsen J.N., Santoni-Rugiu E., Sorensen J.B. Use of TUBBIII for patient stratification and prognosis in lung cancer. Lung Cancer Management 2015;4(2): 97-110. doi:10.2217/lmt.15.6.

4. Derry W.B., Wilson L., Khan I.A. et al. Taxol differentially modulates the dynamics of microtubules assembled from unfractionated and purified beta-tubulin isotypes. Biochemistry 1997;36(12):3554-62. PMID: 9132006.

5. Carre M., Andre N., Carles G. et al. Tubulin is an inherent component of mitochondrial membranes that interacts with the voltage-dependent anion channel. J Biol Chem 2002; 13;277(37):33664-9. Epub 2002 Jun 26. PMID: 12087096.

6. Luduena R.F. A Hypothesis on the Origin and Evolution of Tubulin. Int Rev Cell Mol Biol 2013;302:41-185. doi: 10.1016/B978-0-12-407699-0.00002-9. PMID: 23351710.

7. McCarroll J.A., Gan P.P., Erlich R.B. et al. TUBB3/pIII-tubulin acts through the PTEN/ AKT signaling axis to promote tumorigenesis and anoikis resistance in non-small cell lung cancer. Cancer Res 2015;75(2):415-25. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-14-2740. Epub 2014 Nov 20. PMID: 25414139.

8. Богуш Т.А., Шатурова А.С., Дудко Е.А. и др. Количественная иммунофлуо-ресцентная оценка с использованием проточной цитофлуориметрии экспрессии эстрогеновых рецепторов р в солидных опухолях человека. Вестник московского университета, cер. 2. Химия 2011;52(4): 305-12.