Preview

Российский биотерапевтический журнал

Расширенный поиск

ПРОЯВЛЕНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К БЕЛКУ PRAME

https://doi.org/10.17650/1726-9784-2016-15-4-53-58

Полный текст:

Аннотация

Введение. Белок PRAME является перспективной мишенью для противоопухолевой иммунотерапии, так как не экспрессируется в здоровых тканях, но активен в опухолевых клетках многих гистологических типов. Нами были разработаны мышиные моноклональные антитела (МКАТ) 5D3F2 и 6H8F12, распознающие эпитопы белка PRAME. Цель исследования - определение эффектов, оказываемых МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 на клетки, экспрессирующие ген PRAME на различных уровнях. Материалы и методы. Использовались линии клеток NOMO-1 и WI-38 с низким уровнем экспрессии PRAME, THP-1 - со средним уровнем экспрессии, К562 и WI-38-PRAME - с высоким уровнем экспрессии PRAME. Проводилось инкубирование данных линий клеток с МКАТ 5D3F2 и 6H8F12. Конечная концентрация МКАТ в культуральной среде составила от 6 до 120мкг/мл. Проводился подсчет клеток после инкубирования МКАТ после 24, 48 и 72 ч эксперимента. Количество мертвых клеток оценивали при проведении МТТ-теста после 24 ч инкубирования клеток с МКАТ 6H8F12. Результаты. Скорость роста клеток замедлилась при инкубировании в присутствии МКАТ. Эффект замедления роста клеток увеличивался напрямую с ростом концентрации МКАТ в среде (коэффициент корреляции Пирсона составил 0,67; p = 0,0219). Рост клеток линии К562 был значимо меньшим, чем линии THP-1 (p = 0,0061), NOMO-1 (p = 0,0005) и WI-38 (p = 0,0002), в присутствии одинакового количества МКАТ 6H8F12. Скорость роста клеток линии К562 была ниже, чем клеток линии WI-38-PRAME (p = 0,0027), несмотря на одинаковый уровень экспрессии гена PRAME. Влияние МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 на скорость роста клеток было сопоставимым (p = 0,3946). Согласно данным MTT-теста в линиях K562 и WI-38-PRAME погибало сопоставимое количество клеток после 24 ч инкубирования с МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 (p = 0,8405). При тех же условиях погибло меньше клеток линии THP-1, чем K562 (p = 0,6335). По сравнению с K562 в линиях NOMO-1 и WI-38 погибло существенно меньшее количество клеток (p = 0,0026 и p = 0,0005 соответственно). Заключение. Показано, что МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 проявляют существенный цитотоксический эффект в отношении клеток, экспрессирующих PRAME. При более высоком уровне экспрессии гена PRAME в клетках цитостатический эффект более сильный.

Об авторах

Н. А. Лыжко
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Всеволод Андреевич Мисюрин
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Ю. П. Финашутина
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Т. В. Ахлынина
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Л. А. Кесаева
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


В. В. Тихонова
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Н. Н. Касаткина
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


О. Н. Солопова
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


М. А. Барышникова
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


А. В. Мисюрин
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России
Россия


Список литературы

1. Мисюрин В.А. Аутосомные раково-тестикулярные гены. Российский биотерапевтический журнал 2014;13(3):77-82.

2. Голубцова Н.В., Степанова Е.В., Бармашов А.Е. и др. Определение специфических противоопухолевых антител у больных диссеминированной меланомой в процессе вакцинотерапии. Российский биотерапевтический журнал 2014;11(3):25-8.

3. Williams J.M., Chen G.C., Zhu L., Rest R. F. Using the yeast two-hybrid system to identify human epithelial cell proteins that bind gonococcal Opa proteins: intracellular gonococci bind pyruvate kinase via their Opa proteins and require host pyruvate for growth. Mol Microbiol 199;27(1):171- 86. PMID: 9466265.

4. Лыжко Н.А., Ахлынина Т.В., Мисюрин A3. и др. Повышение уровня экспрессии гена PRAME в опухолевых клетках сопровождается локализацией белка в клеточном ядре. Российский биотерапевтический журнал 2015;14(4):19-30.

5. Stevenson G.T. Three major uncertainties in the antibody therapy of cancer. Haematologica 2014;99(10):1538-1546. DOI: 10.3324/haematol. 2013.084640.

6. Bradbury A.R. M., Sidhu S., Dubel S. et al. Beyond natural antibodies: the power of in vitro display technologies. Nature Biotechnology 2011;29:245-54. DOI: 10.1038/nbt. 1791.

7. Trauth B.C., Klas C., Peters A.M. et al. Monoclonal antibody-mediated tumor re gression by induction of apoptosis. Science 1989;245(4915):301-5. PMID: 2787530.

8. Yonehara S., Ishii A., Yonehara M. A cell-killing monoclonal antibody (anti-Fas) to a cell surface antigen co-downregulated with the receptor of tumor necrosis factor. J Exp Med 1989;169(5):1747-56. PMID: 2469768.

9. Dobson C.L., Main S., Newton P. et al. Human monomeric antibody fragments to TRAIL-R1 and TRAIL-R2 that display potent in vitro agonism. MAbs 2009;1:552- 62. PMID: 20068388.

10. Maegawa M., Takeuchi K., Funakoshi E. et al. Growth stimulation of non-small cell lung cancer cell lines by antibody against epidermal growth factor receptor promoting formation of ErbB2/ ErbB3 heterodimers. Mol Cancer Res 2007;5(4):393-401. DOI: 10.1158/1541 - 7786. MCR-06-0303. PMID: 17426253.

11. Wadelin F.R., Fulton J., Collins H.M. et al. PRAME is a golgi-targeted protein that associates with the Elongin BC complex and is upregulated by interferon-gamma and bacterial PAMPs. PLoS One 2013;8(2):e58052. PMID: 23460923.

12. Costessi A., Mahrour N., Ti-jchon E. The tumour antigen PRAME is a subunit of a Cul2 ubiquitin ligase and associates with active NFY promoters. EMBO J 2011;30(18):3786-98. DOI: 10.1038/ emboj.2011.262. PMID: 21822215.

13. De Carvalho D.D., Mello B.P, Pereira W.O., Amarante-Mendes G.P. PRAME/EZH2-mediated regulation of TRAIL: a new target for cancer therapy. Curr Mol Med 2013;13(2):296-304. PMID: 23228130.

14. Мисюрин В.А., Лукина А.Е., Мисюрин А.В. и др. Особенности соотношения уровней экспрессии генов PRAME и PML/RARa в дебюте острого промиелоцитарного лейкоза. Российский биотерапевтический журнал 2014;13(1):9-16.

15. Xu Y., Rong L.-J., Meng S.-L. et al. PRAME promotes in vitro leukemia cells death by regulating S100A4/p53 signaling. European Review for Medical and Pharmacological Sciences 2016;20:1057-63. PMID: 27049257.

16. Huang Q., Li L., Lin Z. et al. Identification of Preferentially Expressed Antigen of Melanoma as a Potential Tumor Suppressor in Lung Adenocarcinoma. Med Sci Monit 2016;22:1837-42. PMID: 27241212.

17. Ахлынина Т.В., Мисюрин А.В., Лыжко Н.А. и др. Наличие иммуногенного антигена в опухолевой клетке способствует антипролиферативному действию дендритных клеток. Российский биотерапевтический журнал 2014;13(4):23-30.

18. Kawasaki T., Taro K. Toll-Like Receptor Signaling Pathways. Front Immunol 2014;5(461). DOI: 10.3389/fimmu. 2014.00461.


Для цитирования:


Лыжко Н.А., Мисюрин В.А., Финашутина Ю.П., Ахлынина Т.В., Кесаева Л.А., Тихонова В.В., Касаткина Н.Н., Солопова О.Н., Барышникова М.А., Мисюрин А.В. ПРОЯВЛЕНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К БЕЛКУ PRAME. Российский биотерапевтический журнал. 2016;15(4):53-58. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2016-15-4-53-58

For citation:


Lyzhko N.A., Misyurin V.A., Finashutina Y.P., Akhlynina T.V., Kesaeva L.A., Tikhonova V.V., Kasatkina N.N., Solopova O.N., Baryshnikova M.A., Misyurin A.V. DEVELOPMENT OF CYTOSTATIC EFFECT OF MONOCLONAL ANTIBODIES TO THE PROTEINS PRAME. Russian Journal of Biotherapy. 2016;15(4):53-58. (In Russ.) https://doi.org/10.17650/1726-9784-2016-15-4-53-58

Просмотров: 48


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1726-9784 (Print)
ISSN 1726-9792 (Online)