Preview

Российский биотерапевтический журнал

Расширенный поиск
Том 15, № 4 (2016)
https://doi.org/10.17650/1726-9784-2016-15-4

ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ 

8-17 154
Аннотация
Фундаментальной проблемой в лечении рака остается идентификация клеток, способных инициировать и поддерживать рост опухоли. До недавнего времени предполагалось, что все клетки опухоли обладают одинаковой способностью инициировать опухоль и формировать метастазы. Сегодня достоверно показано, что такими свойствами обладает небольшая популяция особых клеток, называемых стволовой клеткой опухоли (СКО). СКО - это специфическая опухолевая клетка, долгоживущая и медленно пролиферирующая, способная при трансплантации иммунодефицитным животным инициировать рост опухоли, идентичной исходной. СКО характеризуются чрезвычайной терапевтической устойчивостью, которая в ответ на лечение только возрастает. Регрессия опухоли и длительная ремиссия после лечения зависят от уничтожения этой самой важной части опухолевых клеток. В обзоре обсуждаются пути возникновения опухоли, характерные особенности СКО, ее роль в метастазировании и терапия, направленная на СКО.
18-24 176
Аннотация
Для выявления причины патологического состояния, установления диагноза и контроля эффективности лечения у больных онкогематологическими заболеваниями используют методы молекулярной диагностики. В результате хромосомных перестроек в опухолевых клетках при гемобластозах либо возникают химерные онкогены, либо активируется гиперэкспрессия важных регуляторных генов. Это принципиальное различие в исходе хромосомных перестроек необходимо учитывать при разработке молекулярно-генетических диагностикумов. Методы молекулярной диагностики существенно превосходят в чувствительности другие подходы, поэтому они очень эффективны при выявлении остаточных опухолевых клеток и для раннего выявления рецидива.
25-33 290
Аннотация
Иммунная система играет особую роль в развитии опухолевого процесса. С одной стороны, она способна бороться с раком с помощью врожденного и приобретенного звеньев, с другой стороны - опухоль может использовать иммунные клетки для защиты от противоопухолевого ответа. Дендритные клетки (ДК) являются основными антигенпредставляющими клетками и поэтому активно участвуют в развитии иммунного ответа на присутствие в организме опухолевых клеток. ДК способны захватывать опухолевые антигены и представлять их Т-клеткам, вызывая тем самым опухолеспецифический Т-клеточный ответ. Однако в большинстве случаев терапия рака c использованием препаратов ДК не позволяет достичь клинически значимого эффекта. Одна из основных причин - неблагоприятное воздействие на ДК микроокружения опухоли. Важным этапом работы по улучшению методов биотерапии с использованием ДК является определение факторов, вызывающих нарушение функций ДК при раке, а восстановление нормальных функций ДК у онкологических больных представляет собой одну из основных задач иммунотерапии рака. В настоящем обзоре рассмотрены основные виды патологических изменений, которые происходят в ДК под влиянием опухоли.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ 

49-52 187
Аннотация
Введение. Нарушение функционирования BRCA1 приводит к развитию ряда онкологических заболеваний, включая рак молочной железы (РМЖ), рак яичника, немелкоклеточный рак легкого, рак желудка, рак поджелудочной железы. Недавно продемонстрирована прогностическая и предиктивная значимость BRCA1, белка репарации ДНК ERCC1 в плане характера течения заболевания и чувствительности/резистентности к химиотерапии, но заключения неоднозначны. Цель исследования - уточнение возможной прогностической значимости экспрессии в опухоли BRCA1 путем проведения строго количественной оценки уровня маркера в ткани РМЖ у пациентов c благоприятным и неблагоприятным прогнозом в соответствии со статусом рецепторов эстрогенов (РЭ) в опухолях, различающихся по чувствительности к препаратам платины. Материалы и методы. Оценка экспрессии BRCA1 проведена в 50 хирургических образцах РМЖ (40 - с положительным статусом РЭ и 10 - с отрицательным) с использованием количественного иммунофлуоресцентного метода, сопряженного с проточной цитофлуориметрией. Суспензии клеток опухоли инкубировали с первичными антителами к BRCA1 (SD118, Calbiochem) и со вторичными флуоресцентными антителами (DyLight650, ab98729, Abcam). Измерение флуоресценции проводили на проточном цитофлуориметре FACSCanto II (Becton Dickinson, США) с применением программного обеспечения FACSDiva 6.0. Показатели экспрессии BRCA1 анализировали с помощью программы FlowJo 10.0 с использованием статистического метода Колмогорова - Смирнова. Уровень экспрессии BRCA1 определяли как количество специфически флуоресцирующих клеток относительно общего количества исследованных. Результаты. Экспрессия BRCA1 идентифицирована во всех исследованных образцах ткани РМЖ со средним значением уровня экспрессии 36,8 ± 7,6 % и медианой 37 %. При расчете t-критерия Стьюдента отмечено статистически значимое различие средних значений уровня экспрессии BRCA1 (р = 0,02) в группах больных с положительным и больных с отрицательным статусом РЭ (38,0 ± 7,5 и 32,0 ± 6,3 % соответственно). Сравнение уровня экспрессии BRCA1 с использованием теста Манна - Уитни также выявило статистически значимое различие (р = 0,016). Различия в средних значениях уровня экспрессии BRCA1 оказались особенно выраженными (р = 0,007) при сравнении групп пациентов с положительным и с отрицательным статусом РЭ со значениями экспрессии BRCA1 меньше медианы (32,4 ± 5,0 и 26,8 ± 2,9 % соответственно). При сравнении показателей экспрессии BRCA1 в опухолях с негативным статусом РЭ и медианы уровня экспрессии BRCA1 по всей группе исследованных опухолей (37 %) выявлена корреляция сниженного уровня экспрессии BRCA1 с отрицательным статусом РЭ в опухоли. Значения уровня экспрессии белка BRCA1 ниже медианы выявлены у 80 % пациентов с отрицательным статусом РЭ в опухоли, выше медианы - в 20 % случаев соответственно. Выводы. Результаты исследований показали, что белок BRCA1 экспрессируется на различном уровне в опухолевой ткани у всех пациентов с РМЖ. Пониженный уровень экспрессии BRCA1 выявляется чаще в РЭ-негативных по сравнению с РЭ-позитивными опухолями, а отсутствие РЭ в ткани РМЖ является неблагоприятным фактором прогноза, соответственно пониженный уровень экспрессии BRCA1 имеет неблагоприятное прогностическое значение.
53-58 145
Аннотация
Введение. Белок PRAME является перспективной мишенью для противоопухолевой иммунотерапии, так как не экспрессируется в здоровых тканях, но активен в опухолевых клетках многих гистологических типов. Нами были разработаны мышиные моноклональные антитела (МКАТ) 5D3F2 и 6H8F12, распознающие эпитопы белка PRAME. Цель исследования - определение эффектов, оказываемых МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 на клетки, экспрессирующие ген PRAME на различных уровнях. Материалы и методы. Использовались линии клеток NOMO-1 и WI-38 с низким уровнем экспрессии PRAME, THP-1 - со средним уровнем экспрессии, К562 и WI-38-PRAME - с высоким уровнем экспрессии PRAME. Проводилось инкубирование данных линий клеток с МКАТ 5D3F2 и 6H8F12. Конечная концентрация МКАТ в культуральной среде составила от 6 до 120мкг/мл. Проводился подсчет клеток после инкубирования МКАТ после 24, 48 и 72 ч эксперимента. Количество мертвых клеток оценивали при проведении МТТ-теста после 24 ч инкубирования клеток с МКАТ 6H8F12. Результаты. Скорость роста клеток замедлилась при инкубировании в присутствии МКАТ. Эффект замедления роста клеток увеличивался напрямую с ростом концентрации МКАТ в среде (коэффициент корреляции Пирсона составил 0,67; p = 0,0219). Рост клеток линии К562 был значимо меньшим, чем линии THP-1 (p = 0,0061), NOMO-1 (p = 0,0005) и WI-38 (p = 0,0002), в присутствии одинакового количества МКАТ 6H8F12. Скорость роста клеток линии К562 была ниже, чем клеток линии WI-38-PRAME (p = 0,0027), несмотря на одинаковый уровень экспрессии гена PRAME. Влияние МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 на скорость роста клеток было сопоставимым (p = 0,3946). Согласно данным MTT-теста в линиях K562 и WI-38-PRAME погибало сопоставимое количество клеток после 24 ч инкубирования с МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 (p = 0,8405). При тех же условиях погибло меньше клеток линии THP-1, чем K562 (p = 0,6335). По сравнению с K562 в линиях NOMO-1 и WI-38 погибло существенно меньшее количество клеток (p = 0,0026 и p = 0,0005 соответственно). Заключение. Показано, что МКАТ 5D3F2 и 6H8F12 проявляют существенный цитотоксический эффект в отношении клеток, экспрессирующих PRAME. При более высоком уровне экспрессии гена PRAME в клетках цитостатический эффект более сильный.
59-64 203
Аннотация
Введение. Среди многообразных форм воспаления, многие из которых способствуют росту опухолей, классическая реакция воспаления - гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) - способна их элиминировать. Искусственно индуцированная интратуморально, она может быть успешно применена в иммунотерапии. Известно, что уровень противоопухолевого иммунитета коррелирует с интенсивностью реакции, поэтому мы использовали результаты собственных предварительных исследований, которые позволили повысить уровень ГЗТ в несколько раз. Ранее нами был выявлен парадоксальный механизм разнонаправленного контроля реакции ГЗТ на разных стадиях антигенами II класса МНС-I-A-молекулами, экспрессированными на поверхности антигенпрезентирующих клеток. Этот факт необходимо строго учитывать при разработке схем иммунотерапии. Цель исследования - разработка эффективных способов экспериментальной иммунотерапии на основе ГЗТ с использованием средств и способов ее регуляции. Материалы и методы. Описанный выше феномен использован в разработке 2 способов экспериментальной иммунотерапии карциномы легкого Льюиса у мышей BDF1. ГЗТ к лабораторному антигену овальбумину индуцировали интратуморально и стимулировали точечно с учетом разнонаправленности развития реакции либо аспирином (опосредованно повышающим экспрессию I-А-антигенов) в стадии индукции, либо никотинамидом (подавляющим ее) в эффекторной фазе реакции. Результаты. Показано, что ГЗТ к овальбумину, индуцированная интратуморально и стимулированная аспирином или никотинамидом, обеспечивает торможение роста опухоли соответственно на 81,5 и 86,5 % по сравнению с контролем. Заключение. Показано 2 способа экспериментальной иммунотерапии опухоли на основе ГЗТ со строгим учетом разнонаправленности контроля реакции I-А-антигенами. Согласно данным литературы в числе агентов, способных изменять экспрессию I-A-молекул, кроме аспирина и никотинамида есть много известных, широко применяемых в клинике препаратов. Несоблюдение правил разнонаправленности развития ГЗТ при их назначении не только приводит к слабому терапевтическому эффекту, но и может вызвать стимуляцию роста опухоли. Вероятно, в этом кроется причина наблюдаемой непредсказуемости в иммунотерапии. Очевидно, что для разработки адекватных схем лечения необходимо осторожное, точечное вмешательство в ход конкретной защитной иммунной реакции в соответствии с молекулярным механизмом ее регуляции. Полученные результаты могут стать основанием для апробирования подобных методических подходов в клинике.
65-71 118
Аннотация
Введение. Разработка новых моделей диссеминированной меланомы кожи человека с молекулярно-генетической мишенью для таргетной терапии повышает результативность доклинических исследований in vitro и in vivo новых антимеланомных средств и их комбинаций. Такая возможность реализована путем адаптации к росту in vivo оригинальной линии клеток пигментированной меланомы кожи человека mel Cher и получения подкожного (п/к) ксенографта под контролем трансплантационных, морфологических, молекулярно-генетических (мутация V600E BRAF) и химиотерапевтических (чувствительность к ингибитору BRAF-киназ вемурафенибу) характеристик. Цель исследования - получение из линии клеток mel Cher п/к ксенографта пигментированной меланомы кожи человека с мутацией V600E BRAF, чувствительной к специфической таргетной терапии. Материалы и методы. Использованы линия клеток пигментированной меланомы кожи человека mel Cher из коллекции ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России (РОНЦ) и иммунодефицитные мыши-самки Balb/c nude разведения РОНЦ. Искомые характеристики определены при многократном п/к трансплантировании in vivo с помощью методов трансплантационной биологии, световой микроскопии, молекулярной генетики и экспериментальной химиотерапии. Чувствительность к ингибитору BRAF-киназы вемурафенибу оценена под контролем скорости роста опухоли (V/Vq) по адекватным для пациентов показателям: наличие полной ремиссии и возможность рецидива. Результаты. При п/к трансплантации 107 клеток линии mel Cher получены цитологически идентичные перевиваемые п/к ксенографты с устойчивой кинетикой роста на 4-9-м пассажах (латентная фаза 8 дней, экспоненциальная - до 14, стационарная - до 24) и наличием мутации V600E BRAF. Вемурафениб в разовой дозе 75 мг/кг вызвал полную ремиссию в течение 15-дневного курса и в течение 7 дней после его отмены, с последующим рецидивом. Заключение. Полученный из линии клеток пигментированной меланомы кожи человека mel Cher чувствительный к вемурафенибу п/к ксенографт с мутацией V600E BRAF пригоден для доклинического изучения направленных на эту мишень новых противомеланомных средств.
72-77 111
Аннотация
Введение. Правительства разных стран стремятся снизить быстро растущие расходы на здравоохранение. Использование качественных и чаще всего более дешевых, чем оригинальные бренды, препаратов-дженериков существенно сокращает затраты и одновременно обеспечивает надлежащее качество лечения. Поэтому разработка препаратов-дженериков является актуальной задачей. Цель исследования - воспроизводство лекарственной формы для создания отечественного препарата-дженерика эпирубицина. Материалы и методы. В исследованиях использованы субстанция эпирубицина Ph. Eur. действующего издания (Teva, Израиль), фармарубицин (Pfizer Italia Srl для Pfizer Inc., Италия/США) и вспомогательные вещества, соответствующие требованиям нормативной документации. Перевиваемая опухоль мышей: лимфоцитарная лейкемия Р-388. Методы: технологические, фармако-аналитические, биологические и фармакологические. Результаты. Проведенный фармацевтический анализ воспроизведенного препарата-дженерика эпирубицин-РОНЦ® показал, что он по всем показателям качества совпадает с препаратом фармарубицин. Результаты исследования острой токсичности на мышах и крысах и данные наблюдения за экспериментальными животными на протяжении 30 дней после однократного введения позволяют сделать вывод: оба препарата обладают сходными токсикологическими характеристиками и практически идентичны. Воспроизведенный эпирубицин-РОНЦ® и фармарубицин в лиофилизированной лекарственной форме для инъекций 10,0 мг во флаконе, вводимые однократно, проявляют равный противоопухолевый эффект при 2 путях введения на перевиваемой опухоли мышей - лимфоцитарной лейкемии Р-388. Выводы. В ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России воспроизведен препарат-дженерик - эпирубицин-РОНЦ®, который полностью соответствует импортному препарату.
78-84 185
Аннотация
Введение. В связи с перспективностью применения в качестве лекарственного средства аналога гипоталамического гормона соматостатина (АГГС), синтезированного в лаборатории химического синтеза ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России и показавшего высокую противоопухолевую активность, возникает потребность в создании лекарственной формы и оптимальной технологии ее получения. В ходе предварительных исследований в качестве модели лекарственной формы для АГГС выбраны липосомы, технологический процесс получения которых имеет ряд специфических стадий. Цель исследования - разработка технологии получения липосомальной лекарственной формы АГГС. Материалы и методы. Липосомы АГГС получали методом Бенгема в модификации для гидрофобных субстанций. Для уменьшения диаметра липосом использовали методы экструзии, гомогенизации и обработки ультразвуком. Анализ размера липосом проводили методом корреляционной спектроскопии светорассеяния с использованием наносайзера. Значение рН липосомальной дисперсии определяли методом потенциометрии. Количественное содержание лекарственного вещества измеряли методом спектрофотометрии с использованием стандартного образца при (282 ± 3) нм и спиртового раствора пустых липосом в качестве раствора сравнения. Количество включенного препарата рассчитывали как отношение концентрации лекарственного вещества в липосомальной дисперсии после фильтрации к его концентрации в дисперсии после получения. Результаты и выводы. Гидрофобная природа субстанции АГГС обуславливает технологические особенности получения липосомальной лекарственной формы. Так, на стадии формирования липидной пленки субстанция растворяется в органическом растворителе вместе с липидами, а полученную липидную пленку гидратируют раствором криопротектора. Измельчение липосом АГГС целесообразнее проводить с применением методов гомогенизации или экструзии, что обусловлено высокой производительностью указанных методов, сохранением стабильности липосом и высокого процента включения АГГС в липосомальный бислой. На этапе отделения не включенной в липосомы субстанции АГГС, учитывая нерастворимость данного вещества в воде, можно воспользоваться методом фильтрации, не прибегая к сложным процедурам гель-фильтрации, диализа и т. д. Кроме того, процесс отделения невключившейся субстанции можно совместить со стерилизацией липосомальной дисперсии путем выбора специфического фильтрующего материала.
85-88 143
Аннотация
Введение. Препарат цифетрилин, аналог гипоталамического гормона соматостатина, разработан в ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. В основу настоящей работы положена идея об использовании цифетрилина в качестве специфического носителя цитотоксических групп. Цель исследования - синтез цитотоксических аналогов цифетрилина с целью изучения влияния наличия цитотоксических фрагментов на его противоопухолевую активность. Результаты. Классическими методами пептидной химии синтезированы 5 новых аналогов цифетрилина, модифицированных цитотоксическими агентами. Соединения получены присоединением к цифетрилину по N-группе цистеина или по N-группе лизина хлорфенацила или гидролизованного цифелина (цитотоксического препарата). Очистку полученных пептидов проводили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле. Чистота соединений подтверждена элементным анализом, тонкослойной хроматографией, углом оптического вращения и данными высокоэффективной жидкостной хроматографии. Проведены предварительные исследования их противоопухолевой активности на перевиваемых опухолях мышей - аденокарциноме молочной железы Ca755 и меланоме В16. Заключение. Синтезированы новые пептиды - аналоги цифетрилина, содержащие цитотоксические фрагменты, подтверждены их строение и чистота.
89-95 174
Аннотация
Цель работы - исследование потенциальной противоопухолевой активности координационных соединений редкоземельных элементов. Материалы и методы. Исследованы цитотоксическая (in vitro) и противоопухолевая (in vivo) активность 28 координационных соединений редкоземельных элементов - иодиды и перхлораты, содержащие в качестве лиганда антипирин. Результаты. Исследованные соединения в концентрации 100 мкМ не оказывали цитотоксического действия на клетки опухолей человека 5линий различного гистогенеза. Однако в экспериментах на животных с солидными перевиваемыми опухолями обнаружена противоопухолевая активность для двух комплексов - антипириновых производных иодидов гадолиния и неодима. Заключение. Полученные данные указывают на целесообразность более углубленного изучения противоопухолевой активности 2 комплексов (антипириновых производных иодидов гадолиния и неодима) на большем количестве мышей, с изменением доз, в том числе на асцитных опухолях, а также при подкожном и пероральном путях введения.
96-101 203
Аннотация
Введение. При проведении регионарной интраперитонеальной (внутрибрюшинной) химиотерапии применяются цитостатики в пролонгированной лекарственной форме, в частности, на основе различных биодеградируемых гидрогелей, например фосфата декстрана. Цель исследования - сравнительная оценка противоопухолевой активности гидрогеля цисплатина (ГГЦП) и цисплатина (ЦП) на асцитной гепатоме Зайделя. Материалы и методы. На 49 белых нелинейных крысах (n = 7) с перевитой внутрибрюшинно гепатомой Зайделя изучена противоопухолевая активность пролонгированной лекарственной формы ЦП с гидрогелем фосфата декстрана при однократном внутрибрюшинном введении в диапазоне доз по ЦП от 3 до 8 мг/кг (~ максимально переносимая доза) в сравнении с фармакопейным ЦП. Об эффективности судили по стандартным критериям: числу крыс без асцита на 32-е сутки опыта (полная ремиссия) и увеличению продолжительности жизни крыс с асцитом (лечение (treatment)/контроль (control), Т/С > 125 %) в сравнении с группами без лечения (контрольная, где Т/С = 100 %) и лечения ЦП. Использованы методы макроскопического, патоморфологического и статистического анализа результатов. Результаты. Показано, что ГГЦП в сравнении с неэффективным ЦП был высокоэффективным: полная ремиссия 4/7-6/7 против 0/7, Т/С = 140-188 % против 91-101 %, объем асцита 13,6 ± 6,6 мл против 50,0 ± 7,9 мл (р = 0,004) на фоне удовлетворительной переносимости. Регрессионный анализ подтверждает, что ГГЦП в диапазоне доз достоверно улучшает выживаемость крыс с асцитной гепатомой Зайделя, снижая риск смерти в 7-35 раз и относительный риск при дозе 5,5мг/кг - в 36 раз (95 % доверительный интервал 3,86-327,60;р = 0,002-0,005). Заключение. Полученные данные позволяют рассматривать ГГЦП как перспективный пролонгированный препарат ЦП для интраперитонеальной терапии и рекомендовать его доклиническое изучение.
102-109 178
Аннотация
Введение. Мутации гена BCR-ABL являются основной причиной резистентности больных хроническим миелолейкозом (ХМЛ) к иматинибу - ингибитору тирозинкиназ 1-го поколения (ИТК-1). Некоторые из этих мутаций могут приводить также и к резистентности к нилотинибу и дазатинибу - ингибиторам тирозинкиназ 2-го поколения (ИТК-2), причем наборы мутаций для этих препаратов различны. В связи с тем что ИТК-2 применяют для лечения больных ХМЛ, резистентных к иматинибу, для корректного назначения этих препаратов необходимо знать частоту появления разных видов мутаций гена BCR-ABL. Цель исследования - определить частоту встречаемости мутаций гена BCR-ABL у больных ХМЛ, резистентных к иматинибу. Материалы и методы. Мутации гена BCR-ABL исследовали в крови больных ХМЛ, резистентных к иматинибу, методом прямого секвенирования продуктов полимеразной цепной реакции по Сэнгеру. Результаты. Мутации гена BCR-ABL были выявлены у 31 % (n = 262/846) больных ХМЛ. Доля всех мутаций, перекрестно резистентных как к иматинитбу (ИТК-1), так и к препаратам 2-й линии (ИТК-2), составила для нилотиниба 40,3 %, для дазатиниба - 21 %. Выводы. Более половины мутаций гена BCR-ABL, обнаруженных у больных ХМЛ, резистентных к иматинибу, вызывают также и резистентность к одному или другому препарату ИТК-2. В связи с этим при смене терапии с ИТК-1 на ИТК-2 у резистентных к ИТК-1 больных ХМЛ проведение мутационного анализа является обязательным, так как при случайном назначении этих препаратов высока вероятность, что они могут оказаться неэффективными.
110-116 127
Аннотация
Введение. Костный мозг (КМ) является одной из «излюбленных» зон поражения при фолликулярной лимфоме (ФЛ) - до 70 % случаев. Вместе с тем сопоставление субпопуляционного состава лимфоцитов КМ больных ФЛ с иммунофенотипом первичной опухоли и характеристиками неопухолевого микроокружения до настоящего времени не проводилось. Цель исследования - сопоставление субпопуляционного состава лимфоцитов КМ больных ФЛ с иммунофенотипом первичной опухоли и характеристиками неопухолевого микроокружения. Материалы и методы. В исследование включены 78 больных ФЛ. Во всех случаях диагноз был верифицирован иммуногистохимически в соответствии с критериями классификации Всемирной организации здравоохранения (2008). Результаты. При отсутствии специфического поражения КМ по данным гистологического исследования у больных отмечено достоверное повышение содержания цитотоксических CD8+ лимфоцитов в КМ - 21,9 ± 4,5и 10,1 ± 1,7 %;р = 0,005. Наличие специфического поражения по данным гистологического исследования трепанобиоптатов КМ сопровождалось достоверным повышением уровня В-клеток (CD19+, CD20+), а также CD10+ лимфоцитов в аспиратах КМ. Содержание Т-лимфоцитов КМ(CD5+CD19-) было достоверно более высоким в CDW-негативных случаях ФЛ (32,2 ± 7,6 и 13,5 ± 3,4 %; р = 0,021). Количество В-клеток в КМ (CD19+CD5-, CD10+) было достоверно более высоким в CDW-позитивных случаях (p < 0,05). В случаях выраженной Т-клеточной инфильтрации первичной опухоли уровни костномозговых В-клеток со специфическим для ФЛ иммунофенотипом (CD10+, CD19+CD23+) были достоверно более низкими, р = 0,001 и 0,048 соответственно. Повышенное содержание лимфоцитов в КМ достоверно ассоциируется с повышенным содержанием Т-клеток: CD3, CD5, CD7, CD4, CD8. Вместе с тем содержание зрелых В-клеток (CD20+, CD22+) было одинаковым в 2 сравниваемых группах, а содержание В-лимфоцитов (CD19+, CD19+CD5-), а также В-клеток, экспрессирующих HLA-DR, CD23, CD10, CD38, - более высоким при отсутствии лимфоцитоза в КМ. По этим причинам верификация поражения КМ у больных ФЛ должна быть только иммунологической. Уровни зрелых В-лимфоцитов КМ (CD19, CD20, CD22) были достоверно более высокими у больных с нормальным содержанием оксифильных нормобластов в миелограмме. Заключение. Наши данные указывают на то, что верификация поражения КМ у больных ФЛ должна быть только иммунологической. Т-клеточное микроокружение первичной опухоли препятствует диссеминации ФЛ в КМ. Субпопуляционный состав лимфоцитов КМ взаимосвязан с иммунофенотипом ФЛ (CD10). Костномозговое микроокружение (CD8+ лимфоциты) ассоциируется с отсутствием специфического поражения КМ по данным гистологического исследования трепанобиоптатов КМ.
117-122 214
Аннотация
Введение. У 25 % больных фолликулярной лимфомой (ФЛ) на момент установления диагноза присутствуют симптомы интоксикации, или В-симптомы. Вероятно, это обусловлено возникающим при лимфомах дисбалансом эндогенных цитокинов. Усиление продукции некоторых цитокинов сопровождается подъемом температуры тела, нарушением липогенеза, анорексией и, как следствие, снижением массы тела, возникновением ночной профузной потливости, что, возможно, связано с опосредованным влиянием цитокинов на вегетативную нервную систему. Цель исследования - изучение клинической и прогностической значимости присутствия симптомов интоксикации в дебюте ФЛ. Материалы и методы. В исследовании анализировалась группа из 74 больных ФЛ, у которых в дебюте заболевания отмечались В-симптомы. Группу сравнения составили 207 больных ФЛ, не имевших на момент установления диагноза симптомов интоксикации, связанных с опухолью. Результаты. У больных с В-симптомами имела место достоверно более высокая оценка по шкале ECOG, достоверно чаще наблюдалось снижение уровня гемоглобина < 120 г/л, достоверно чаще отмечались повышение уровня лактатдегидрогеназы и снижение общего белка в сыворотке крови. Наличие В-симптомов при ФЛ указывает на высокую опухолевую нагрузку. У большинства таких больных установлены распространенные стадии ФЛ (90,5 %), достоверно чаще встречалось поражение более чем 4 зон лимфатических узлов (75,7 %), как проявление генерализованного нодального опухолевого процесса достоверно чаще отмечалось поражение периферических лимфатических узлов, расположенных выше диафрагмы (81,1 %), лимфатических узлов средостения (35,1 %), забрюшинного пространства (74,3 %). На момент диагностики ФЛ у значительного числа больных выявлялось поражение более 1 экстранодального органа, достоверно чаще диагностировалось поражение селезенки и печени. В соответствии с критериями FLIPI 64,2 % больных ФЛ, имеющих В-симптомы, были отнесены к группе высокого риска. У больных с В-симптомами качество ответа на терапию первой линии было достоверно хуже: у 25 % отмечена прогрессия опухоли во время лечения или сразу после его окончания. Наличие В-симптомов достоверно ухудшает показатели общей выживаемости и выживаемости без прогрессирования. Заключение. Наличие симптомов интоксикации является самостоятельным неблагоприятным прогностическим фактором и должно учитываться при выборе тактики ведения больных ФЛ.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ 

34-36 145
Аннотация
Введение. Поиск патогенетически обоснованных подходов к лечению немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) является несомненно одной из первоочередных задач, так как результаты лекарственного лечения этого заболевания нельзя признать удовлетворительными. Открытие нового класса ядерных рецепторов - эстрогеновыхрецепторов ß (3Pß), которые экспрессируются в ткани НМРЛ, послужило серьезным основанием для развития новой стратегии лечения НМРЛ - антиэстрогеновой терапии. Цель исследования - получение ответа на клинически значимый вопрос, какое число пациентов с НМРЛ и с метастазами в легком опухолей другой первичной локализации являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии. Материалы и методы. Проведена сравнительная количественная оценка частоты и уровня экспрессии ЭРß в ткани НМРЛ и метастазов в легком (суммарно 74 образца) при использовании иммунофлуоресцентного метода и проточной цитофлуориметрии. Результаты. Экспрессия ЭРß выявлена в подавляющем числе образцов НМРЛ и метастазов в легком (92 и 86 % соответственно). Средний уровень экспрессии ЭРß в ткани НМРЛ статистически значимо выше по сравнению с метастазами (42,0 % против 34,6 %, р = 0,03). Первичные опухоли с высоким (> 50 %) уровнем экспрессии ЭРß и суммарно с низким и умеренным (< 50 %) уровнем выявлены в 35 и 65 % случаев, а метастазы с аналогичными показателями экспрессии маркера - у 14 и 86 % пациентов соответственно. Заключение. Экспрессия в опухоли ЭРß прогнозирует более благоприятное течение болезни, одной из причин этого может быть больший метастатический потенциал опухолевых клеток с низким уровнем экспрессии ЭРß. Около 70 % пациентов с НМРЛ и с метастатическим поражением органа являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии в адъювантном режиме.
37-39 248
Аннотация
Цель исследования - изучение субпопуляционной структуры лимфоцитов периферической крови первичных больных раком молочной железы. Материалы и методы. С помощью многопараметрового проточно-цитометрического анализа исследовали периферическую кровь 70 первичных больных раком молочной железы и 39 здоровых женщин. Использовали моноклональные антитела к антигенам CD3, CD4, CD8, CD16, CD56, CD19, CD45. Результаты. Статистически достоверное нарушение линейной структуры лимфоцитов - Т-клеток с фенотипом CD45+/ CD3+/CD19-, В-лимфоцитов с фенотипом CD45+/CD3-/CD19+ и NK-лимфоцитов с фенотипом CD45+/CD3-/CD16+56+ - выявляется только при анализе индивидуальных иммунограмм, но не при анализе всей группы больных раком молочной железы. Заключение. На основе анализа частоты встречаемости нарушений среди больных раком молочной железы с низкими показателями соотношения CD4/CD8 определены 4 различных варианта нарушений.
40-43 125
Аннотация
Цель работы - синтез окислительно-восстановительного дендримера (REDOX-дендримера), ядром которого является тетраглицидиловый эфир пентаэритрита, а дендроном - производные антрахинона. Материалы и методы. Аналитическую и препаративную хроматографию проводили на жидкостном хроматографе SP 8000 (Spectra-Physics, США). Хроматограммы регистрировали с помощью УФ-детектора (Spectra-Physics, США) и рефрактометрического детектора (Jobin-Ivon, Франция). Структуру подтверждали методом протонного магнитного резонанса (ПМР) (Bruker WH-360, ФРГ) с рабочей частотой 360 МГц. Контроль за ходом реакций вели с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Результаты. Синтезированы и выделены с помощью препаративной ВЭЖХ производные 2-метилантрахинона, их структура установлена ПМР-спектроскопией. Они использованы в качестве дендрона при синтезе дендримера. Изучена острая токсичность дендримера на мышах-самцах ВDF1. Синтезированы REDOX-дендримеры, содержащие в своей структуре производные метилантрахинона. Показана низкая токсичность REDOX-дендримера. Заключение. Схожесть структуры REDOX-дендримера с доксорубицином и его низкая токсичность дают предпосылки к дальнейшему изучению его противоопухолевой активности.
44-48 179
Аннотация
Введение. Моноклональные антитела (МКАТ) служат надежным и удобным инструментом диагностики патологий человека. Чаще всего они используются в качестве конъюгатов с флуоресцентными и иными метками. Классический подход создания таких конъюгатов сводится к химическим реакциям с использованием белковой основы моноклональных антител. Вместе с тем для целого ряда МКАТ изготовление конъюгата сопровождается встраиванием метки в антигенсвязывающий участок, что приводит к уменьшению или полной потере специфической активности конъюгата. Выходом из данной ситуации может стать синтез флуоресцентных конъюгатов методами углеводной химии через пространственно удаленные от активного центра олигосахариды антител. Цель исследования - показать принципиальную возможность химической модификации олигосахаридов МКАТ серии ICO и получить на их базе флуоресцентные конъюгаты. Материалы и методы. В работе использовалась панель МКАТ серии ICO высокой степени очистки. Олигосахариды МКАТ, окисляясь до альдегидных групп, подвергались взаимодействию с гидразиновым производным биотина и конъюгировались со стрептавидин-флуоресцеином. Полученный комплекс был использован для прямой реакции иммунофлуоресценции. Результаты. Все модифицированные МКАТ сохраняли специфичность связывания с клетками-мишенями, присущую нативным антителам. Заключение. Данный метод может быть альтернативой для конъюгирования флуоресцентных меток с МКАТ, для которых методы белкового синтеза приводят к потере активности конъюгата.


ISSN 1726-9784 (Print)
ISSN 1726-9792 (Online)