Анализ динамики субпопуляции Т-регуляторных клеток CD4+CD25+ при метастатическом почечно-клеточном раке

Введение. Терапия интерфероном альфа (ИФН-α) остается возможной лечебной опцией у больных метастатическим почечно-клеточным раком (мПКР) с благоприятным и промежуточным прогнозом. Однако у ряда больных отмечается отсутствие клинического эффекта, несмотря на активацию клеточного звена противоопухолевого иммунитета. Представляет интерес изучение роли популяции супрессорных клеток с фенотипом CD4⁺CD25⁺, которые, по данным различных авторов, могут подавлять противоопухолевый иммунный ответ. Повышение количества этих клеток в периферической крови обнаруживается при различных злокачественных новообразованиях. Цель исследования - определить эффективность и переносимость ИФН-α у больных мПКР и изучить динамику субпопуляции CD4⁺CD25⁺ Т-лимфоцитов и ее связь с эффективностью терапии ИНФ. Материалы и методы. В период с 2011 по 2016 гг. 41 пациент с мПКР получал терапию ИФН-α. У 32 пациентов терапия проводилась в 1 линии, у 9 - в 2 и более. Оценка иммунологических параметров осуществлялась в течение 1 нед до начала иммунотерапии, через 2 нед после начала и через 8 нед в период контрольного обследования. Иммунофенотип лимфоцитов оценивали методом многоцветной проточной цитометрии с использованием антител, в том числе к CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD25 и перфорину. Статистический анализ и обработка данных выполнялись с помощью программы STATISTICA версии 13. Результаты. Полный эффект достигнут у 2 (4,8 %) пациентов, частичный - у 9 (21,9 %) пациентов; объективный эффект (полная + частичная ремиссии) составил 26,8 %. Длительная стабилизация болезни (≥6 мес) отмечена у 19 (46,3 %) пациентов. Общая частота контроля над заболеванием (полная + частичная ремиссии + длительная стабилизация) составила 73,1 %. Медиана времени до прогрессирования составила 8 мес (p = 0,03). У пациентов с объективным ответом исходное содержание CD4⁺CD25⁺-популяции Т-лимфоцитов было практически в пределах донорских показателей (3,5 ± 2,1 %) и составляло 4,4 ± 3,0 % (p <0,05), в то время как у пациентов с прогрессированием заболевания исходное содержание этой субпопуляции Т-лимфоцитов было в 3 раза выше: 12,1 ± 8,0 %. При этом следует отметить тенденцию к снижению содержания данной субпопуляции на фоне лечения в группе с клиническим эффектом. Заключение. Исходно повышенное содержание субпопуляции CD4⁺CD25⁺-Т-лимфоцитов в периферической крови больных может являться отрицательным прогностическим фактором при иммунотерапии ИФН-α, вероятнее всего за счет иммунорегуляторной субпопуляции CD4+CD25+FOXP3+CD127^low-T-клеток (Treg). Целесообразно дальнейшее исследование данной субпопуляции Т-клеток как потенциального маркера эффективности иммунотерапевтического подхода.

Т-регуляторные клетки, интерферон альфа, метастатический почечно-клеточый рак, T-regulatory cells CD4⁺CD25⁺, interferon alpha, metastatic renal cell carcinoma

1. Sakaguchi S. Naturally arising FOXP3-ex-pressing CD25+CD4+ regulatory T-cells in immunological tolerance to self and nonself. Nat Immunology 2005;6(4):345-52. DOI: 10.1038/ni1178. PMID: 15785760.

2. Wei W.Z., Morris G.P., Kong Y.C. Anti-tumor immunity and autoimmunity: a balancing act of regulatory T-cells. Cancer Immunol Immunother 2004;53(2):73-8. DOI: 10.1007/s00262-003-0444-1. PMID: 14610619.

3. Кадагидзе З.Г., Черткова А.И., Славина Е.Г. Иммунорегуляторные CD25+C-D4+-Т-клетки. Российский биотерапевтический журнал 2006;5(2):13-20.

4. Baecher-Allan C., Brown J., Freeman G. et al. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood. J Immunol 2001;167(3):1245-53. PMID: 11466340.

5. Быковская С.Н., Карасев А.В., Лохонина А.В., Клейменова Е.Б. Анализ Т-регуляторных клеток CD4+CD25+FOXP3+ при аутоиммунных заболеваниях. Молекулярная медицина 2013;3:20-8.

6. Sakaguchi S., Miyara M., Costantino C.M., Hafler D.A. FOXP3+ regulatory T-cells 2'2017 том 16 I vol. 16 in the human immune system. Nat Rev Immunol 2010;10(7):490-500. DOI: 10.1038/nri2785. PMID: 20559327.

7. Gambineri E., Torgerson T., Ochs H. Immune dysregulation, polyendocrinopathy, enteropathy and X-linked inheritance (IPEX), a syndrome of systemic autoimmunity caused by mutations of FOXP3, a critical regulator of T-cell homeostasis. Curr Opin Rheumatol 2003;15(4):430-5. PMID: 12819471.

8. Liu W., Putnam A., Xu-Yu Z. et al. CD127 expression inversely correlates with FOXP3 and suppressive function of human CD4+Treg cells. J Exp Med 2006;203(7):1701-11. DOI: 10.1084/jem.20060772. PMID: 16818678. PMCID: PMC2118339.

9. Yang Z.Z., Ansell S.M. The role of Treg-cells in the cancer immunological response. Am J Immunol 2009;5(1):17-28.

10. Lуez-Hoyos M., Segundo D., Arias M. Cellular immunotolerance in the transplant. Adv Exp Med Biol 2012;741:44-59. DOI: 10.1007/978-1-4614-2098-9_4. PMID: 22457102.

11. Жулай Г.А., Олейник Е.К. Регуляторные Т-лимфоциты CD4+CD25+FOXP3+. Перспективы применения в иммунотерапии. Труды Карельского научного центра РАН 2012;2:3-17.

12. Workman C., Szymczak-Wrrkman A., Collison L. et al. The development and function of regulatory T-cells. Cell Mol Life Sci 2009;66(16):2603-22. DOI: 10.1007/s00018-009-0026-2. PMID: 19390784. PMCID: PMC2715449.

13. Thornton A., Korty P., Tran D. et al. Expression of Helios, an Ikaros transcription factor family member, differentiates thymic-derived from peripherally induced FOXP3+ T-regulatory cells. J Immunol 2010;184(7):3433-41. DOI: 10.4049/jimmunol.0904028. PMID: 20181882. PMCID: PMC3725574.

14. Baron U., Floess S., Wieczorek G. et al. DNA demethylation in the human FOXP3 locus discriminates regulatory T-cells from activated FOXP3+ conventional T-cells. Eur J Immunol 2007;37(9):2378-89. DOI: 10.1002/eji.200737594. PMID: 17694575.

15. Janson P.C., Winerdal M.E., Marits P. et al. FOXP3 promoter demethylation reveals the committed Treg population in humans. PLoS One 2008;3(2):e1612. DOI: 10.1371/journal.pone.0001612. PMID: 18286169.

16. Hawiger D., Wan Y.Y., Eynon E.E., Flavell R.A. Homeodomain only protein is required for the function of induced regulatory T-cells in dendritic cell-mediated peripheral T-cell unresponsiveness. Nat Immunol 2010;11(10):962-8. DOI: 10.1038/ni.1929. PMID: 20802482.

17. Tran D.Q., Andersson J., Hardwick D. et al. Selective expression of latency-associated peptide (LAP) and IL-1 receptor type I/II (CD121a/CD121b) on activated human FOXP3+ regulatory T-cells allows for their purification from expansion cultures. Blood 2009;113(21):5125-33. DOI: 10.1182/blood-2009-01-199950. PMID: 19299332.

18. Elkorda E., Sharma S., Burt D.J., Hawkins R.E. Expanded subpopulation of F OXP3+ T-regulatory cells in renal cell carcinoma co-express Helios, indicating they could be derived from natural but not induced Tregs. Clin Immonol 2011;140(3):218-22. DOI: 10.1016/j.clim.2011.04.014. PMID: 21570917.

19. Siddiqui SA., Frigola X., Bonne-Annee S. et al. Tumor-infiltrating FOXP3- CD4+CD25+ T-cells predict poor survival in renal cell carcinoma. Clin Cancer Res 2007;13(7):2075-81. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-06-2139. PMID: 17404089.

20. Cesana G.C., DeRaffele G., Cohen S. et al. Characterization of CD4+CD25+ regulatory T-cells in patients treated with high-dose interleukin-2 for metastatic melanoma or renal cell carcinoma. J Clin Oncol 2006;24(7):1169-77. DOI: 10.1200/JCO.2005.03.6830. PMID: 16505437.

21. Schwarzer A., Wolf B., Fisher J.L. et al. Regulatory T-cells and associated pathways in metastatic renal cell carcinoma (mRCC) patients undergoing DC-vaccination and cytokine-therapy. PLoS One. 2012;7(10):e46600. DOI: 10.1371/journal.pone.0046600. PMID: 23118856.

22. Finke J.H., Rini B., Ireland J. et al. Sunitinib reverses type-1 immune suppression and decreases T-regulatory cells in renal cell carcinoma patients. Clin Cancer Res 2008;14(20):6674-82. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-07-5212. PMID: 18927310.

23. Носов Д.А. Метастатический рак почки: новые лекарственные возможности и рациональные лечебные подходы. Автореф. дис.. д-ра мед. наук. М., 2012. 201 с.