Канцерогенез - процесс превращения нормальной клетки в опухолевую под влиянием мутаций, которые в ней накапливаются. Причиной возникновения опухолевых клеток является накопление ею мутации, которое происходит в результате возникновения генетической нестабильности. Процесс развития опухоли разделяют на 3 основных этапа: инициацию, промоцию и прогрессию. На этапе инициации клетка получает первый мутационный удар, который приводит к нарушению ее генетической стабильности. Чаще всего мутациям подвергаются протоонкогены, гены-супрессоры опухолевого роста, а также гены, регулирующие процесс репарации ДНК. На данном этапе происходит накопление в клетке генетических поломок, которые ведут к повышению степени ее злокачественности. На этапе промоции уже трансформированные в результате мутации клетки приобретают ряд свойств, помогающих им выжить в окружающей среде. Они перестают реагировать на сигналы, поступающие из окружающей среды, приобретают ауто- и паракринную стимуляцию сигналов пролиферации, происходят торможение процесса апоптоза, генетическая нестабильность, изменение морфологии клетки и наблюдается отсутствие репликативного старения. Клетки опухолевого клона постоянно мутируют под давлением отбора со стороны иммунной системы организма. Это ведет к качественным изменениям фенотипа опухолевых клеток, возникновению вместо одного множества опухолевых клонов. Данный этап называется опухолевой прогрессией. В результате увеличения массы опухоли ей требуется все большее количество питательных веществ. Происходит стимуляция ангиогенеза. Из-за снижения степени сродства клетки к субстрату и увеличения ее подвижности возникают вторичные очаги, метастазы. Развитие опухолевого процесса захватывает все новые участки в организме. Несмотря на постоянное совершенствование методов терапии опухолей, число пациентов, которые достигают длительной ремиссии, невелико. Поэтому исследователи ищут пути для более полного и глубокого изучения патогенеза опухолей, поскольку это будет способствовать разработке эффективных подходов к терапии. В данной статье кратко описываются основные стадии развития опухоли.

Введение. Проточно-цитометрические (ПЦ) алгоритмы детекции минимальной остаточной болезни (МОБ) хорошо отработаны и близки по чувствительности к молекулярно-биологическим методам. Однако помимо информативных лейкозассоциированных иммунофенотипов, отобранных с учетом фенотипа опухоли на этапе диагностики, необходимо принимать во внимание специфичность проводимой таргетной терапии и ее воздействие на клетку. Цель работы - отобрать стабильные комбинации антигенов для выявления В-линейных предшественников у больных на терапии блинатумомабом (анти-CDW). Материалы и методы. Больному Г., 4 лет, с ранним рецидивом острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) (пре-пре-В иммуноподварианта) после 3 курсов противорецидивного лечения с учетом сохранения МОБ-положительного статуса был назначен блинатумомаб в режиме монотерапии. Иммунофенотип опухолевых В-лимфобластов был детально охарактеризован иммунологически методом ПЦ согласно протоколу консорциума EuroFlow как в дебюте заболевания, так и в рецидиве. Мониторинг МОБ в рецидиве проводили методом 8-цветной ПЦ с учетом индивидуально отобранных лейкозассоциированных иммунофенотипов. Результаты. У больного, получающего лечение блинатумомабом, в курсе терапии В-линейного ОЛЛ была изменена стратегия мониторинга МОБ. С учетом отсутствия экспрессии CD19 основой идентификации В-линейных предшественников стали cyCD22 в сочетании с ядерной TdT и CD10. Заключение. В случае назначения блинатумомаба в курсе терапии В-линейного ОЛЛ выявление В-линейных предшественников должно основываться на оценке экспрессии других пан-В-клеточных антигенов. В первую очередь это cyCD22 или cyCD79a в сочетании с ядерной TdT и CD10 в пределах ядросодержащих клеток образца.

Цель исследования - изучение количественных профилей экспрессии матричной РНК потенциальных генов-мишеней при диссеминированном раке желудка (ДРЖ). Материалы и методы Применяли количественную полимеразную цепную реакцию в реальном времени на парных образцах опухоль - норма. Результаты. Наиболее часто (25-41 % случаев) повышенный уровень матричной РНК в опухоли по отношению к контролю наблюдался для генов TGF-ß (трансформирующий фактор роста ß), NRP-1 (нейропилин 1) и генов семейства VEGF (фактор роста эндотелия сосудов). Впервые при раке желудка обнаружена корреляция уровней экспрессии 3 генов: TGF-ß, NRP-1 и VEGFR-2 и обратная корреляция уровней экспрессии генов VEGF и bFGF (основной фактор роста фибробластов). Заключение. Выявленная корреляция экспрессии генов TGF-ß, NRP-1 и VEGFR-2 обусловлена, видимо, взаимодействием NRP-1 с продуктами 2 других генов и может быть связана с высоким метастатическим потенциалом прогрессирующей опухоли при ДРЖ. Обнаруженная обратная корреляция экспрессии генов VEGF-А и bFGF может свидетельствовать о стимуляции ангиогенеза в опухоли при сниженной активности пути VEGF через активизацию сигнального пути bFGF. Полученные результаты следует учитывать при таргетной терапии ДРЖ.

Введение. Эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП) - фактор, связанный с метастатическим потенциалом опухолевых клеток. Отличительным признаком данной трансформации является, в частности, экспрессия несвойственного для эпителиальных клеток белка мезенхимальных клеток - виментина. Данные об уровне ЭМП и клинической значимости маркера в прогнозе опухолей различных локализаций, в том числе рака яичников, неоднозначны. Цель исследования - характеристика ЭМП в ткани рака яичников на основании количественной оценки уровня коэкспрессии эпителиальных цитокератинов и маркера мезенхимальных клеток виментина. Материалы и методы. Количественная оценка уровня коэкспрессии цитокератинов и виментина проведена при последовательном (двойном) иммунофлуоресцентном окрашивании клеток, полученных из 58 хирургических образцов серозного рака яичников III стадии, с использованием проточной цитофлуориметрии. Результаты. В настоящем исследовании разработан и использован оригинальный метод двойного иммунофлуоресцентного окрашивания, позволяющий количественно оценить уровень ЭМП по показателю коэкспрессии в эпителиальных клетках цитокератинов и виментина. Эпителиальные клетки, коэкспрессирующие эти маркеры, выявлены в 100 % исследованных опухолей при индивидуальных различиях показателя от 10 до 86 %. Средний уровень коэкспрессии цитокератинов и виментина в подгруппах с уровнем показателя выше и ниже медианы, равной 42 %, различался значительно и составил соответственно 28,5 ± 7,5и 56,3 ± 11,8 % (р = 0,02). Заключение. Серозный рак яичников III стадии представляет молекулярно неоднородную группу злокачественных новообразований с принципиальными отличиями в уровне экспрессии фенотипа ЭМП в опухолях разных больных. В половине случаев заболевание характеризуется высоким метастатическим потенциалом опухолевых клеток. Выявление клеток, коэкспрессирующих цитокератины и виментин, во всех исследованных опухолях указывает на значимость этой молекулярной характеристики в патогенезе рака яичников.

Введение. В последние годы возродился интерес к гормональному лечению рака яичников, в связи с чем возник ряд фундаментальных вопросов, связанных с экспрессией в опухолях этой локализации эстрогеновых рецепторов (estrogen receptors, ER) альфа и бета (ERa и ERß). Цель исследования - ответить на вопросы, каковы частота и уровень экспрессии ERa и ERß в ткани рака яичников и возможна ли коэкспрессия ERa и ERß в разных и/или в одних и тех же клетках новообразования. Материалы и методы. Проведена сравнительная количественная оценка частоты и уровня экспрессии ERa и ERß в ткани рака яичников (суммарно 20 образцов) с использованием иммунофлуоресцентного метода и проточной цитофлуориметрии, включая разработанный авторами метод двойного флуоресцентного окрашивания. Результаты. Экспрессия ERß выявлена во всех образцах рака яичников, при этом встречались как ERa+-, так и ERar-опухоли. В большинстве (69 %) ERa+-опухолей наблюдался низкий (<40 %) уровень экспрессии ERa. Более того, при исследовании опухолей с высоким уровнем экспрессии как ERa, так и ERß выявлена коэкспрессия данных маркеров в одних и тех же клетках исследованных опухолей. Заключение. В ткани рака яичников ER разных типов - ERa и ERß - могут экспрессироваться в разных опухолевых клетках, а также коэкспрессироваться как в разных, так и в одних и тех же клетках новообразования.

Введение. Эпигенетические изменения генов-супрессоров опухолевого роста рассматривают как наиболее тонкий и динамичный механизм регуляции генов, в том числе генов, вовлеченных в развитие рака молочной железы (РМЖ). Огромный интерес в изучении роли метилирования в патогенезе РМЖ представляют гены, расположенные на коротком плече хромосомы 3, и ген MGMT (10q26), для которых имеются крайне противоречивые данные об уровне их метилирования в опухолях. Цель исследования - изучение роли метилирования промоторных районов генов RASSF1A, SEMA3B, RARß2, RHOA, GPX1, USP4, DAG1, NKIRAS1 и MGMT в патогенезе эпителиальных опухолей молочной железы. Материалы и методы. Образцы опухолевой и окружающей гистологически неизмененной ткани от 174 больных РМЖ собраны и клинически охарактеризованы в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Анализ метилирования ДНК проводили с использованием 2 независимых методов. Метилирование генов RASSF1A, SEMA3B, RARß2 и MGMT изучали с помощью полимеразной цепной реакции, специфичной к метилированному аллелю. Анализ метилирования промоторных районов генов RHOA, GPX1, USP4, DAG1 и NKIRAS1 выполняли с применением 2 метилчувствительных рестриктаз - HpalI и HhaI - и последующей полимеразной цепной реакции. Результаты. Показана статистически значимо высокая частота метилирования генов RASSF1A, SEMA3B, RARß2 и MGMT в эпителиальных опухолях молочной железы по сравнению с гистологически нормальной тканью от тех же пациенток. Выявлены значимые корреляции частоты метилирования генов RARß2 и MGMT с различными клинико-морфологическими характеристиками злокачественного процесса. Впервые показана статистически значимая связь между метилированием генов RASSF1A, RARß2 и MGMT и выживаемостью пациенток. Заключение. Полученные данные об эпигенетических нарушениях при люминальном типе РМЖ дополняют «молекулярный портрет» этого вида рака и вносят вклад в понимание его патогенеза. Выявленные особенности метилирования исследованных генов могут найти клиническое применение для разработки современных подходов к прогнозированию, профилактике и выбору тактики лечения РМЖ у пациенток московского региона.

Цель работы - оценка перспективности производных гликозидов индолокарбазола, содержащих аминокислотные остатки, как потенциальных противоопухолевых соединений. Материалы и методы. Для 32 соединений по структурным формулам с использованием методов хемоинформатики рассчитали ряд молекулярных дескрипторов и вероятность проявления различных видов биологической активности, в экспериментах in vitro оценили цитотоксическую активность с помощью МТТ-теста на 5 линиях клеток. Результаты. Для изученных аминокислотных производных гликозидов индолокарбазола компьютерным методом предсказана высокая вероятность противоопухолевой активности при низкой вероятности цитотоксической активности in vitro. Низкая цитотоксическая активность подтверждена в МТТ-тесте на 5 линиях клеток. Компьютерными методами получен прогноз механизмов возможной противоопухолевой активности и рассчитан ряд молекулярных дескрипторов, имеющих значение для квалификации веществ как потенциальных лекарств. Заключение. Целесообразно дальнейшее исследование противоопухолевой активности аминокислотных производных гликозидов индолокарбазола в опытах на животных с перевиваемыми опухолями.

Введение. Препараты из группы производных N-алкил-N-нитрозомочевины активно и успешно применяются в онкологической практике. Однако поиск новых высокоэффективных противоопухолевых агентов из этой группы в настоящее время является актуальным. Цель исследования - изучение in vivo противоопухолевой активности нового отечественного препарата из группы производных N-алкил-N-нитрозомочевины - ормустина - на солидных перевиваемых опухолях мышей: меланоме В16 и эпидермоидной карциноме легкого Льюис. Материалы и методы. Оценку противоопухолевой активности ормустина и препарата сравнения - мюстофорана (Les Laboratoires Servier, Франция) - проводили на мышах B6D2F1. Ормустин в диапазоне доз 50-135 мг/кг вводили мышам внутривенно однократно. Мюстофоран вводили внутривенно 2-кратно в дозе 32 мг/кг (на 2-е и 9-е сутки) и 3-кратно в дозе 25 мг/кг (на 2, 6 и 9-е сутки). Наблюдение за животными продолжали до их гибели. Противоопухолевый эффект препаратов оценивали по торможению роста опухоли, увеличению продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контрольными. Результаты. Установлена терапевтическая доза ормустина, равная 125 мг/кг, при однократном внутривенном введении мышам с меланомой В16 или эпидермоидной карциномой легкого Льюис. Выводы. Ормустин обладает высокой противоопухолевой активностью на солидных перевиваемых опухолях мышей. На меланоме В16 ормустин по терапевтическому эффекту не уступает мюстофорану.

Введение. В настоящее время активно проводится поиск лекарственных средств, направленно воздействующих на специфические молекулярные или клеточные мишени опухолей. Таргетный противоопухолевый препарат аимпила представляет собой нековалентный комплекс альфа-фетопротеина (АФП) с атрактилозидом. Основой для его разработки послужила способность АФП как транспортного белка доставлять цитотоксические агенты в клетки, имеющие рецепторы к АФП. Цель исследования - изучение токсичности препарата аимпила в хроническом эксперименте на кроликах. Материалы и методы. В исследовании использовано 60 кроликов породы «Советская шиншилла», самцов и самок. Препарат в виде готовой лекарственной формы - желатиновых капсул - вводили перорально в 1 и 10 терапевтических дозах (0,05 и 0,5 мг/кг соответственно) ежедневно в течение 30 сут. В ходе исследования у животных определяли массу тела, проводили клинический и биохимический анализы крови, анализ мочи, снимали электрокардиограмму. На 1-е и 30-е сутки по окончании курса введений по 5 животных из каждой группы подвергали эвтаназии и затем проводили патоморфологическое исследование их внутренних органов. Результаты. Исследование показало, что ежедневное пероральное применение аимпилы в течение 30 сут в дозе, эквивалентной 1 терапевтической, не оказывает влияния на клинико-лабораторные показатели и структуру органов и тканей кроликов. У животных, получавших высокую дозу препарата, были обнаружены признаки гепато-, нефро-, кардио- и гастроинтестинальной токсичности. Повреждения структуры печени, найденные при микроскопическом анализе, клинически выражались в виде достоверного увеличения уровня аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови. Морфологические изменения почек сопровождались значимым повышением уровней уробилиногена и кетоновых тел в моче. Признаки кардио- и гастроинтестинальной токсичности выявлялись только при патоморфологическом исследовании органов. Обнаруженные изменения были обратимы в течение 30 сут. Выводы. Выявленные токсические свойства лекарственной формы аимпилы дозозависимы и обратимы. Препарат рекомендуется для дальнейшего изучения.

Введение. В последнее время наблюдается устойчивый интерес к скринингу противоопухолевых и антиангиогенных веществ, блокирующих несколько механизмов активации ангиогенеза в опухоли. В качестве ингибиторов ангиогенеза большое внимание уделяется разработке эффективных и малотоксичных лекарственных средств на основе лекарственного растительного сырья. Настоящая статья посвящена стандартизации лекарственной формы димерного макроциклического танина (ДМТ), выделенного в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России из соцветий кипрея узколистного Chamerion angustifolium (L.) Holub и представляющего значительный интерес в качестве антиангиогенного средства. Цель исследования - выбор критериев качества для стандартизации препарата «ДМТ, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 100 мг». Материалы и методы. В работе использованы лекарственная форма «ДМТ, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 100 мг» и субстанция ДМТ. Методы исследования: спектрофотометрия, инфракрасная спектроскопия, высокоэффективная жидкостная хроматография, потенциометрия, поляриметрия. Результаты. С учетом требований Государственной фармакопеи РФ XIII издания к препаратам для инъекций выбраны критерии качества лиофилизированной лекарственной формы ДМТ и разработаны методики их определения. Выводы Путем лабораторных исследований показано, что выбранные критерии качества и разработанные для их определения методики позволяют корректно контролировать качество лекарственной формы «ДМТ, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 100 мг».

Введение. Настоящая работа посвящена исследованию уровня и селективности накопления в опухоли инфракрасного фотосенсибилизатора (ФС) тетра-3-фенилтиофталоцианина гидроксиалюминия в липосомальной лекарственной форме по отношению к нормальным тканям. Цель исследования - изучение уровня и селективности накопления ФС на опухолевых моделях мышей при внутримышечной и подкожной перевивке с целью выбора оптимального способа перевивки и сроков начала проведения фотодинамической терапии. Материалы и методы. В работе использовали перевиваемые опухоли мышей: солидные варианты карциномы Эрлиха (ELD) и саркомы S-37, эпидермоидную карциному легкого Льюис (Lewis lung carcinoma, LLC) и аденокарциному толстой кишки (АКАТОЛ). Исследование провели на половозрелых иммунокомпетентных мышах-гибридах (СВА х С57Вl/6)F1, (C57Bl/6 х DBA/2)F1 и мышах линий С57В1/6 и BALB/c. Для оценки уровня липосомальной лекарственной формы ФС в тканях применяли спектрально-флуоресцентный метод. Результаты. Карциному Эрлиха (ELD) для обеспечения высокого накопления ФС целесообразно перевивать внутримышечно. Через 5 ч после введения концентрация ФС в опухоли составляет более 7 мг/кг, индекс селективности накопления в опухоли, по сравнению с нормальной тканью, равен 3. На саркоме S-37 при подкожной перевивке высокая концентрация ФС в ткани опухоли наблюдается через 5 ч после введения и составляет 5,4 мг/кг, индекс селективности накопления достигает 4,3. LLC целесообразно перевивать внутримышечно. Через 5 ч после введения концентрация ФС в опухоли составляет более 7,5 мг/кг, индекс селективности накопления превышает 4. На АКАТОЛ при внутримышечной перевивке через 7 ч после введения концентрация ФС в опухоли составляет 6,8 мг/кг, индекс селективности накопления - около 2. Выводы. Липосомальная лекарственная форма ФС при внутривенном введении селективно накапливается в ткани опухоли. Полученные экспериментальные данные позволяют рекомендовать способ перевивки представленных опухолевых моделей мышей при исследованиях ФС.

Введение. Один из современных подходов к созданию противоопухолевых лекарств основан на направленном поиске ингибиторов молекулярных мишеней, специфических для опухолевых клеток. Использование таких лечебных средств позволит повысить избирательность действия и снизить побочное действие лекарственной терапии. В ФГБНУ НИИНА разработан оригинальный мультитаргетный противоопухолевый препарат антрафуран (ЛХТА-2034), представляющий собой производное антра [2,3-b] фуран-3-карбоксамида. Препарат проявил высокую противоопухолевую активность in vivo. Цель исследования - доклиническое токсикологическое изучение противоопухолевого препарата антрафуран (ЛХТА-2034). Материалы и методы. Исследование проведено на 30 беспородных крысах самцах. Препарат вводили внутрибрюшинно ежедневно в течение 14 дней в разовых дозах 3 и 4,5 мг/кг, суммарно составляющих максимально переносимую (МПД) и расчетную дозу, вызывающую гибель 50 % животных (ЛД₅₀). В ходе исследования определяли массу тела, проводили клинический и биохимический анализ крови, анализ мочи, снимали электрокардиограмму. На 1-е и 30-е сутки по окончании курса по 5 животных из каждой группы подвергали эвтаназии, определяли массовые коэффициенты сердца, печени, почек, селезенки и тимуса, проводили патоморфологическое исследование внутренних органов. Результаты. Показано, что внутрибрюшинное введение ЛХТА-2034 не оказывает влияния на изученные клинико-лабораторные показатели состояния животных. Применение ЛХТА-2034 в дозе, суммарно составляющей МПД, не вызывает повреждений структуры органов и тканей крыс. При патоморфологическом исследовании печени, почек и тонкой кишки у животных, получавших высокую дозу препарата, были выявлены обратимые повреждения структуры. Морфологические признаки кардиотоксичности ЛХТА-2034 были зарегистрированы у отдельных животных через 30 дней после окончания курса введений препарата. Заключение. Токсические эффекты, возникающие под действием антрафурана, зависят от величины примененной дозы и являются обратимыми. Это позволяет рекомендовать его для дальнейшего изучения.

Введение. Добавление в молекулу активных метаболитов, в частности аминокислот, влияет на физико-химические и пролекарственные свойства гликозидов индолокарбазола. С помощью методов компьютерной хемоинформатики предсказана вероятность противоопухолевой активности аминокислотных производных гликозидов индолокарбазола (АПГИК) при низкой вероятности их цитотоксической активности in vitro. На основании этих данных провели изучение этих соединений in vivo. Цель исследования - оценка АПГИК как потенциальных противоопухолевых средств. Материалы и методы. Исследование проводили на опухолевой модели мышей - раке шейки матки РШМ-5. Препараты вводили мышам линии СВА внутрибрюшинно 5-кратно ежедневно с интервалом 24 ч. Наблюдение за животными продолжали до их гибели. Противоопухолевый эффект препаратов оценивали по торможению роста опухоли и увеличению продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контрольными. Результаты. Оттитрована оптимальная доза для данного ряда соединений, равная 100 мг/кг. Оценена противоопухолевая активность АПГИК на РШМ-5. Выводы. На основе полученных данных предлагается расширенное исследование in vivo противоопухолевых свойств отобранных 5 лидерных АПГИК.